腺病毒介導酪氨酸羥化酶基因治療大鼠泌乳素瘤實驗研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文腺病毒介導酪氨酸羥化酶基因治療大鼠泌乳素瘤實驗研究姓名：許志勤申請學位級別：博士專業(yè)：神經外科指導教師：蘇長保;陳松森2000.5.1中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文 中文摘要摘 要垂體腺瘤是下丘腦一垂體系統(tǒng)最常見、最重要的內分泌腫瘤，也是最常見，的顱內腫瘤之一。f 對垂體腺瘤的現代綜合治療，不僅要求切除腫瘤，防止復發(fā)，、解除臨床癥狀，而且要求達到生物學上的治愈。但目前仍有部分垂體腺瘤尤其是大腺瘤、侵襲性腺瘤難以

2、完全切除，即使手術后采取放療和／或藥物治療，垂體功能仍不能恢復正常，甚至腫瘤復發(fā)；有些患者雖然對溴隱停等藥物治療敏感，但有一定副作用，更存在長期用藥的不便。上述存在的問題是目前垂體腺瘤治療的難點，尚未得到解決，有待研究更加有效的治療方法。J／臨床實踐和實驗研究證明，多巴胺( D A ) 或多巴胺激動劑，如溴隱?？梢酝ㄟ^激活多巴胺受體途徑，使垂體泌乳素( P R L ) 瘤體積縮小和分泌P R L 降低。酪氨酸羥化酶( t y r o s

3、 i n eh y d r o x y l a s e ，T H ) 是多巴胺合成的限速酶，若用攜帶T H基因的表達載體轉染P R L 瘤細胞，使腫瘤細胞自身表達T H 增加，在充足的作用底物( 酪氨酸) 和協(xié)同因子( 四氫生物蝶呤，B H 4 ) 存在下，將促使多巴胺合成量增加，以達到治療P R L 瘤的目的?；谏鲜鏊悸罚覀兲岢隽艘源笫驪 R L 瘤為模型進行腺病毒介導T H 基因治療大鼠P R L 瘤實驗研究的課題，經過申請后該

4、課題獲得國家自然科學基金資助。本研究即為該課題的一部分，包含兩部分內容：一．應用2 9 3 細胞內同源重組法和細菌內同源重組法分別構建了攜帶大鼠T He D N A 的復制缺陷性5 型腺病毒載體A d v t h 和p A d —G F P ．T H ：，’。1 ．應用傳統(tǒng)的2 9 3 細胞內同源重組法構建了復制缺陷型腺病毒A d v t h 。先將T Hc D N A 克隆至穿梭質粒p A E l s p l A ，然后與腺病毒基因組