腺病毒介導(dǎo)的小鼠Flt3-L基因治療G422膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：研究Flt3-L基因?qū)422膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療作用。　　方法：本研究采用重組腺病毒介導(dǎo)的小鼠Flt3-L基因治療小鼠G422膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。通過腺病毒介導(dǎo)的綠色熒光蛋白基因(Ad-GFP)轉(zhuǎn)染G422細(xì)胞觀察腺病毒轉(zhuǎn)染效果。重組腺病毒攜帶的Flt3-L基因通過RT-PCR、Western-blot檢測Flt3-L蛋白的表達(dá)。攜有Flt3-L基因的重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染G422細(xì)胞，通過四唑鹽比色試驗(yàn)(MTT法)測量轉(zhuǎn)染后G422

2、細(xì)胞的增殖情況?！　〗Y(jié)果：當(dāng)重復(fù)感染度(MOI)=100時(shí)，重組腺病毒介導(dǎo)的綠色熒光蛋白基因(Ad-GFP)在轉(zhuǎn)染G422細(xì)胞36小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到90﹪以上。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞裂解后做RT-PCR試驗(yàn)，結(jié)果顯示Ad-Flt3-L組在700bp與600bp標(biāo)準(zhǔn)DNA之間出現(xiàn)一條高亮度的約620bp左右的條帶，而對(duì)照組沒有。Ad-Flt3-L轉(zhuǎn)染G422細(xì)胞后，在培養(yǎng)細(xì)胞的上清液中用Western-blot法檢測到