二種抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體檢驗(yàn)方法學(xué)比較及ANCA相關(guān)性腎炎的靶抗原實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence，IIF)和酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assays，ELISA)對(duì)抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)檢測結(jié)果一致性，分析ANCA相關(guān)性血管炎(anti-neutrophil cytoplasmicantibodies，AAV)患者器官受累特點(diǎn)及其靶抗原在ANCA相關(guān)性腎小球腎炎（ANCA associated gl

2、omerulamephritis，ANCA-associated GN）患者中的表達(dá)。
　　方法：收集2011年7月至2013年5月天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院臨床科室提交非重復(fù)ANCA檢測標(biāo)本3852份及相關(guān)患者病例資料，應(yīng)用IIF法和ELISA法聯(lián)合對(duì)標(biāo)本進(jìn)行ANCA檢測。對(duì)87例確診為AAV的患者病例資料進(jìn)行回顧性分析，并篩選經(jīng)腎活檢證實(shí)的未治療的ANCA associated GN患者33例和30例健康人群做為正常對(duì)照，采用IIF法

3、和ELISA法檢測ANCA結(jié)果及血清中溶酶體相關(guān)膜蛋白-2(lysosomal-associated membrane protein-2，LAMP-2)抗體的水平，并觀察其中25例ANCA associated GN患者活動(dòng)期及好轉(zhuǎn)后LAMP-2抗體的動(dòng)態(tài)變化，分析其與疾病活動(dòng)度及腎損害的相關(guān)性。
　　結(jié)果：ELISA法檢測ANCA的陽性率高于IIF法(x2=14.405，p＜0.001)，二種檢測方法總體符合率為94.93％(

4、Kappa=0.611，p＜0.001); ELISA法漏檢率為1.84％，IIF法漏檢率為3.21％; IIF法在抗PR3陽性標(biāo)本組和抗殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白(bactericidal permeability increasing protein，BPI)陽性標(biāo)本組的漏檢率高于抗MPO陽性標(biāo)本組(x2=25.050，p＜0.001;x2=11.623，p＜0.001)。AAV患者以60歲以上老年人男性多見，患病類型以顯微鏡下多血管炎(

5、microscopic polyangiitis，MPA)多見，患者多出現(xiàn)腎臟受累。未治療ANCA associated GN組患者血清中LAMP-2抗體的均值高于緩解期ANCA-associated GN組患者和正常對(duì)照，結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。ANCA associated GN患者疾病緩解后與正常對(duì)照血清中LAMP-2抗體的水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）。在未治療ANCA associated GN組IIF

6、鏡下表現(xiàn)為不典型ANCA熒光模式患者與鏡下表現(xiàn)為其他熒光模式患者血清中LAMP-2抗體的平均值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。相關(guān)性分析顯示，未治療ANCA associated GN患者血清中LAMP-2抗體分別與ESR、Cr、BUN、24小時(shí)尿蛋白定量、新月體比例、BVAS呈正相關(guān)，與ALB、Hb、CCr、呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論：通過對(duì)3852份患者血清標(biāo)本進(jìn)行ANCA檢測，結(jié)果顯示二種檢測方法總體符合率為94.93％(Kap

7、pa=0.611，p＜0.001)，ELISA法的漏檢標(biāo)本占所有陽性標(biāo)本的19.34％，而IIF法的漏檢標(biāo)本則達(dá)到所有陽性標(biāo)本的33.78％。若單獨(dú)使用一種方法進(jìn)行ANCA檢測，將會(huì)導(dǎo)致高比例的陽性標(biāo)本漏檢。對(duì)臨床懷疑為小血管炎、風(fēng)濕性疾病以及肺間質(zhì)纖維化的患者同時(shí)采用二種方法檢測ANCA，以減少相關(guān)疾病的漏診是十分必要的。LAMP-2抗體與ANCA-associatedGN疾病活動(dòng)及腎損害嚴(yán)重程度有一定相關(guān)性?？赡苁桥袛郃NCA as