Caveolin-1對(duì)血管吻合口狹窄的抑制作用及機(jī)制.pdf

1、目的：
　　建立家兔頸總動(dòng)脈血管吻合口狹窄模型，并用局部轉(zhuǎn)染小凹蛋白（Caveolin-1）質(zhì)粒，觀(guān)察血管吻合口狹窄情況，研究caveolin-1對(duì)在血管吻合口狹窄的作用以及與ERK1/2信號(hào)通路的關(guān)系。
　　方法：
　　從南華大學(xué)動(dòng)物中心取成年家兔40只，構(gòu)建血管吻合口再狹窄動(dòng)物模型，運(yùn)用脂質(zhì)體局部轉(zhuǎn)染caveolin-1質(zhì)粒，隨機(jī)分為4組：正常組、手術(shù)組、空轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染組。于術(shù)后第7天取5只兔血管標(biāo)本，用于west

2、ernblot和PCR檢測(cè)蛋白和mRNA的表達(dá)；其余兔于術(shù)后4周處死后取標(biāo)本用于HE染色測(cè)量?jī)?nèi)膜中膜面積比值和免疫組化檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1、組織切片HE染色顯示：與正常組相比，手術(shù)組內(nèi)膜明顯增殖，管壁增厚，管腔縮小；而與手術(shù)組比較，轉(zhuǎn)染組未見(jiàn)明顯內(nèi)膜增殖及管壁增厚，從血管內(nèi)膜/中膜面積比值發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染組比手術(shù)組明顯降低，說(shuō)明 caveolin-1可抑制血管吻合口狹窄。2、RT-PCR測(cè)定caveolin-1和ERK1基因

3、轉(zhuǎn)錄，結(jié)果顯示：與正常組比較,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組的caveolin-1mRNA明顯降低（P＜0.01），提示手術(shù)使caveolin-1的mRNA表達(dá)下調(diào)，而手術(shù)組ERK1 mRNA的表達(dá)明顯升高，轉(zhuǎn)染組表達(dá)明顯降低（P＜0.05）3、免疫組化測(cè)定caveolin-1表達(dá)，結(jié)果顯示：與正常組比較，手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組caveolin-1的表達(dá)明顯降低，用WesternBlot檢測(cè)caveolin-1蛋白的表達(dá),與正常組比較，手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組的c

4、aveolin-1蛋白的表達(dá)明顯降低（P＜0.05），說(shuō)明血管損傷可以使caveolin-1表達(dá)下調(diào)；轉(zhuǎn)染組caveolin-1的表達(dá)明顯增高，說(shuō)明caveolin-1轉(zhuǎn)染成功；免疫組化檢測(cè)磷酸化ERK1/2的表達(dá)，結(jié)果顯示：與正常組比較，手術(shù)組和空轉(zhuǎn)組磷酸化ERK1/2表達(dá)明顯增高，而轉(zhuǎn)染組明顯降低；用蛋白雜交結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)的同樣的趨勢(shì)。提示caveolin-1可以抑制血管吻合口狹窄其機(jī)制可能與抑制ERK1/2活化有關(guān)。
　　結(jié)