2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:觀察去骨瓣減壓術(shù)對(duì)大鼠液壓沖擊腦損傷Nrf2蛋白表達(dá)、神經(jīng)細(xì)胞凋亡及其相關(guān)調(diào)控因子caspase-3和caspase-12表達(dá)的影響,探討去骨瓣減壓術(shù)在液壓沖擊腦損傷中發(fā)揮抗凋亡作用的機(jī)制。
  方法:成年、雄性SD大鼠24只,體重350g±50g(約9周齡),隨機(jī)分為3個(gè)組:假手術(shù)組(sham組)、腦損傷復(fù)骨瓣組(DC-組)和腦損傷去骨瓣減壓組(DC+組),每組各8只。sham組常規(guī)麻醉開(kāi)顱,剪開(kāi)硬膜,但不行液壓沖擊;后兩

2、組均常規(guī)麻醉,頭顱開(kāi)骨窗,行液壓沖擊腦損傷,并剪開(kāi)硬膜,其中DC-組開(kāi)骨窗打擊后,放回原骨瓣,并用牙科丙烯酸水泥粘合固定,縫合頭皮切口; DC+組開(kāi)骨窗打擊后20分鐘內(nèi)用骨鉗從冠狀縫向菱形縫方向擴(kuò)展咬開(kāi)5mm,使骨窗的內(nèi)側(cè)和外側(cè)分別是矢狀縫和上顳線,取出的骨瓣不再放回,縫合頭皮切口。
  所有動(dòng)物術(shù)后24h進(jìn)行神經(jīng)系統(tǒng)功能評(píng)分,并過(guò)度麻醉、斷頭處死,開(kāi)顱取腦,從損傷區(qū)前緣取大約100mg腦組織應(yīng)用干濕重法測(cè)腦組織含水量;經(jīng)損傷區(qū)切

3、成約3-4mm厚冠狀腦組織片,多聚甲醛固定,HE染色行組織學(xué)觀察,免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)Nrf2、caspase-3和caspase-12蛋白表達(dá)變化,原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況;將損傷區(qū)域后緣腦組織迅速置于液氮中,用Western Blot方法檢測(cè)Nrf2核蛋白、caspase-3蛋白和caspase-12蛋白含量。
  結(jié)果:
  1神經(jīng)系統(tǒng)功能評(píng)分
  與sham組相比較, DC+組在術(shù)后

4、24h神經(jīng)功能評(píng)分較低(4.13±0.641),DC-組在術(shù)后24h神經(jīng)功能評(píng)分也較低(2.25±0.707),但DC+組在傷后24h神經(jīng)功能評(píng)分比DC-組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  2組織學(xué)觀察
  與sham組相比,DC-組和DC+組動(dòng)物挫傷灶周腦組織24h見(jiàn)細(xì)胞水腫明顯,體積明顯增大,細(xì)胞核膨大,胞漿淡染,局部呈現(xiàn)空泡樣變,周?chē)殡S膠質(zhì)細(xì)胞增生,但DC-組比DC+組更明顯。而sham組細(xì)胞胞體完整,胞

5、核清晰,胞漿均勻,大小均勻適中。
  3大鼠腦組織含水量檢測(cè)
  與sham組對(duì)比,DC+組在傷后24h腦組織含水量明顯升高(80.638±0.602),DC-組在傷后24h腦組織含水量亦明顯升高(83.203±0.434),但DC+組明顯低于DC-組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  4 Nrf2、Caspase-3和Caspase-12的免疫組織化學(xué)檢測(cè)
  Nrf2蛋白表達(dá):主要表達(dá)于神經(jīng)元細(xì)胞和神

6、經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞核,在正常腦組織中表達(dá)為陰性或弱陽(yáng)性。sham組Nrf2蛋白表達(dá)量很少。與sham組比較,后兩組神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞胞核中Nrf2的表達(dá)明顯增高,但DC+組(42.120±5.333)明顯高于DC-組(28.036±4.662),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  Caspase-3蛋白表達(dá):與sham組比較,后兩組動(dòng)物腦挫傷灶周腦組織中Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及其著色深度明顯增高,且DC+組Caspase-

7、3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(31.082±5.661)明顯低于DC-組(49.927±4.691),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  Caspase-12蛋白表達(dá):與sham組比較,后兩組動(dòng)物腦挫傷灶周腦組織中Caspase-12陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和其著色程度明顯增高,且DC+組Caspase-12陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(29.687±4.728)明顯低于DC-組(48.137±3.523),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  5 Western

8、 Blot檢測(cè)細(xì)胞核Nrf2蛋白,caspase-3和caspase-12蛋白
  與sham組比較,后兩組動(dòng)物腦挫傷灶周腦組織中Nrf2核蛋白表達(dá)明顯增高,DC+組為(0.759±0.024),DC-組為(0.575±0.049),DC+組Nrf2蛋白表達(dá)明顯高于DC-組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  與sham組比較,后兩組大鼠腦挫傷灶周腦組織中caspase-3蛋白表達(dá)明顯增高,DC+組為(0.721±0.0

9、69),DC-組為(0.933±0.0465),DC+組caspase-3蛋白表達(dá)明顯低于DC-組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  與sham組比較,后兩組大鼠腦挫傷灶周?chē)X組織中caspase-12蛋白表達(dá)明顯增高,DC+組為(0.634±0.055),DC-組為(0.827±0.027),DC+組caspase-12蛋白表達(dá)明顯低于DC-組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  6 TUNEL熒光檢測(cè)法檢查凋

10、亡細(xì)胞
  三組動(dòng)物均可見(jiàn)TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞,其中,sham組僅見(jiàn)少量的陽(yáng)性細(xì)胞。與sham組比較,后兩組腦挫傷灶周?chē)X組織中TUNEL陽(yáng)性凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯升高,且DC+組(32.102±5.824)凋亡指數(shù)明顯低于DC-組(45.186±6.536),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  結(jié)論:
  去骨瓣減壓術(shù)能夠上調(diào)Nrf2的活性,通過(guò)抑制caspase-3及caspase-12表達(dá),發(fā)揮抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡的神經(jīng)

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