鈍頂螺旋藻多糖及其抗腫瘤作用的研究.pdf

1、本文進行了鈍頂螺旋藻多糖(polysaccharides from Spirulina platensis，psp)提取工藝的優(yōu)化、分離純化、化學結(jié)構(gòu)測定和抗腫瘤作用的研究。應(yīng)用正交實驗設(shè)計對三氯乙酸(TCA)提取psp法進行優(yōu)化，結(jié)果表明，在提取液pH值=12、提取溫度=90℃及提取時間=8h的最佳條件下，所得psp為白色粉末，糖含量可達81.79[％]，蛋白含量僅為0.57[％]，提取效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)三氯乙酸法，更優(yōu)于傳統(tǒng)的Seva

2、g法；應(yīng)用Superdex-75凝膠柱層析對psp粗多糖進行分離純化及各多糖組分的分子量測定，結(jié)果psp經(jīng)凝膠柱層析分離得到4個不同分子量的多糖組分pspl、psp2、psp3和psp4(分子量依次為65400、16900、14400和11700)，其中psp2多糖組分是psp總糖的主要成份(含量為80[％])，同時對psp2進行微波降解，得到分子量更低的psp5多糖組分(分子量為8900)；應(yīng)用凝膠柱層析、氣相色譜、紅外光譜、核磁共振

3、、高碘酸氧化、硫酸一咔唑法和硫酸鋇比濁法等技術(shù)手段對psp2的一級化學結(jié)構(gòu)進行了較為細致的研究；進行了psp2和psp5體外抗腫瘤實驗的研究，MTT比色法和流式細胞術(shù)表明psp2和psp5均能顯著抑制HeLa、MCF和SVOA細胞的增殖，使其發(fā)生G<,1>期阻滯并能誘導其凋亡。在較低濃度條件下(20、40、80μg/mL)psp2和psp5對HeLa和MCF細胞的作用效果差異不顯著(P>0.05)，80μg/mL的psp2和psp5對S

4、VOA細胞作用效果差異顯著(P<0.05)，而在較高濃度條件下(120、160μg/mL)psp2和psp5對3種腫瘤細胞的作用效果差異極顯著(P<0.01)，說明在較高濃度條件下低分子量的psp5(8900)比高分子量的psp2(16900)抗腫瘤效果相對更明顯。免疫組化結(jié)果表明psp2能顯著降低PCNA、P<'53>和BcL-2的表達并增強P<'21>、p<'16>和Fas的表達，首次提出了psp使腫瘤細胞周期發(fā)生G<,1>期阻滯的