復(fù)合螺旋藻多糖抗輻射抑腫瘤藥理作用研究.pdf

1、本試驗(yàn)以海水鈍頂螺旋藻和銀杏葉有效成分為材料，對(duì)螺旋藻多糖的提取、銀杏葉提取物中銀杏黃酮與銀杏內(nèi)酯的分離進(jìn)行了研究，并將螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分復(fù)合，觀察此復(fù)合制劑抑腫瘤、抗輻射的藥理作用。獲得如下研究結(jié)果:
　　 1、螺旋藻多糖的提取
　　 采用石油醚脫脂，超聲波處理提取螺旋藻多糖，并用三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)，探討了浸提時(shí)間、浸提溫度及浸提液pH對(duì)螺旋藻多糖提取的影響，得出了最佳提取工藝。其中最佳浸提時(shí)間為4h，最佳浸提

2、溫度為80℃，浸提液最佳pH為10。所得到的螺旋藻多糖含量在93％以上，蛋白質(zhì)含量為5.96％。
　　 2、銀杏葉提取物中銀杏黃酮與銀杏內(nèi)酯的分離
　　 將銀杏葉提取物溶于pH為14的堿性溶液中，再將10％HCl逐滴加入溶液中，逐步酸化。當(dāng)溶液pH為6時(shí)銀杏葉提取物中的銀杏內(nèi)酯完全析出。分別冷凍干燥沉淀與溶液，可分別得銀杏內(nèi)酯與銀杏黃酮。
　　 3、中、低劑量復(fù)合螺旋藻多糖對(duì)小鼠S180肉瘤的抑制作用
　　

3、 中劑量(100mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例復(fù)合分別灌服小鼠，觀察對(duì)小鼠S180肉瘤的抑制作用。螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分1∶1比例復(fù)合組、2∶1比例復(fù)合組和1∶2比例復(fù)合組的抑瘤率分別比空白對(duì)照組提高39.436％(P＜0.05)、25.121％(P＜0.05)和36.680％(P＜0.05)。與空白對(duì)照組相比，試驗(yàn)組小鼠的脾指數(shù)、胸腺指數(shù)

4、和外周白細(xì)胞數(shù)都無(wú)顯著差異(P＞0.05)。中劑量螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分復(fù)合使用，對(duì)抑制小鼠S180肉瘤能產(chǎn)生協(xié)同增效作用，且對(duì)小鼠未見(jiàn)免疫損傷。
　　 低劑量(50mg·kg-1·d1)螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例復(fù)合，分別灌服小鼠，觀察對(duì)小鼠S180肉瘤的抑制作用。螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分1∶1比例復(fù)合組、2∶1比例復(fù)合組和1∶2比例復(fù)合組的抑瘤率分

5、別比空白對(duì)照組提高62.281％(P＜0.01)、6.406％(P＞0.05)和42.709％(P＜0.05)。與空白對(duì)照組相比，所有試驗(yàn)組小鼠的脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和外周白細(xì)胞數(shù)都無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 4、復(fù)合螺旋藻多糖對(duì)人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞的抑制作用
　　 螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）1∶1比例復(fù)合組、1∶2比例復(fù)合組和2∶1比例復(fù)合組對(duì)人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞的抑瘤率，

6、高劑量時(shí)分別比空白對(duì)照組提高68.04％(P＜0.01)、59.88％(P＜0.01)和58.82％(P＜0.01);中劑量時(shí)分別比空白組提高47.52％(P＜0.01)、51.98％(P＜0.01)和40.31％(P＜0.01);低劑量時(shí)分別比空白對(duì)照組提高39.70％(P＜0.01)、29.88％(P＜0.01)和27.31％(P＜0.01)。各復(fù)合制劑組的抑瘤率都高于相對(duì)應(yīng)劑量的單一成分組，螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分聯(lián)合使用對(duì)抑制

7、HT29細(xì)胞能產(chǎn)生協(xié)同增效作用。
　　 5、復(fù)合螺旋藻多糖對(duì)人白血病HL60細(xì)胞的抑制作用
　　 螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）1∶1比例復(fù)合組、1∶2比例復(fù)合組和2∶1比例復(fù)合組對(duì)人白血病HL60細(xì)胞的抑瘤率，高劑量時(shí)分別比空白對(duì)照組提高62.30％(P＜0.01)、56.65％(P＜0.01)和58.59％(P＜0.01);中劑量時(shí)分別比空白組提高52.16％(P＜0.01)、4

8、9.14％(P＜0.01)和45.92％(P＜0.01);低劑量時(shí)分別比空白對(duì)照組提高44.62％(P＜0.01)、40.03(P＜0.01)和33.55％(P＜0.01)。各復(fù)合制劑組的抑瘤率都高于相對(duì)應(yīng)劑量的單一成分組，螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分聯(lián)合使用對(duì)抑制HL60細(xì)胞能產(chǎn)生協(xié)同增效作用。
　　 6、復(fù)合螺旋藻多糖抗輻射作用
　　 高劑量(200mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％

9、、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例復(fù)合。分別給昆明種小鼠灌服此三種復(fù)合制劑及螺旋藻多糖、銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯三種單一成分。連續(xù)灌服14天后，用60Coγ-射線全身照射，照射后繼續(xù)灌服16天。與空白組相比，螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分1∶1比例復(fù)合組、2∶1比例復(fù)合組、1∶2比例復(fù)合組、螺旋藻多糖組、銀杏黃酮組和銀杏內(nèi)酯組平均存活天數(shù)分別提高了4.0(P＜0.01)、3.7(P＜0.01)、3.3(P＜0.01)、2.3(P

10、＜0.05)、2.5(P＜0.01)、2.6(P＜0.01);存活率分別提高80％、60％、40％、20％、30％、20％。
　　 中劑量(100mg·kg1·d-1)和低劑量(50mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分（總黃酮含量≥24％、銀杏內(nèi)酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例復(fù)合。分別給昆明種小鼠灌服此復(fù)合制劑及螺旋藻多糖、銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯三種單一成分。連續(xù)灌服14天后，用60Coγ-射線全身照射，

11、照射后繼續(xù)灌服16天。與對(duì)照組相比，中、低螺旋藻多糖組、銀杏黃酮組和銀杏內(nèi)酯組平均存活天數(shù)分別提高了2.8(P＜0.01)、2.2(P＜0.01)、3.0(P＜0.01)、2.5(P＜0.01)、0.5(P＜0.05)、2.6(P＜0.01)，存活率分別提高30％、10％、40％、20％、10％、20％。
　　 與對(duì)照組相比，中、低劑量螺旋藻多糖與銀杏葉有效成分1∶1比例復(fù)合組、2∶1比例復(fù)合組、1∶2比例復(fù)合組、平均存活天數(shù)分