葡萄球菌臨床感染及對(duì)莫匹羅星耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 1．了解溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院2005年1月～2007年12月葡萄球菌(金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌)的臨床分布及耐藥變遷情況，掌握其流行病學(xué)資料，為臨床抗葡萄球菌藥物選擇提供依據(jù)。
　　 2．調(diào)查本院葡萄球菌臨床分離株對(duì)莫匹羅星的耐藥現(xiàn)狀，研究莫匹羅星高水平的耐藥機(jī)制，并分析莫匹羅星耐藥菌株對(duì)臨床常用抗菌藥物的敏感性，為合理使用莫匹羅星及控制莫匹羅星耐藥葡萄球菌的感染及擴(kuò)散提供理論。

2、　　 方法：
　　 1．回顧性調(diào)查2005年1月～2007年12月間臨床分離的葡萄球菌(724株金黃色葡萄球菌，358株表皮葡萄球菌和197株溶血葡萄球菌)的臨床分布情況，并統(tǒng)計(jì)三年間三種葡萄球菌對(duì)氨芐西林/舒巴坦(SAM)、克林霉素(CLI)、紅霉素(ERY)、頭孢唑啉(CFZ)、苯唑西林(OXA)、青霉素(PEN)、利福平(RIF)、四環(huán)素(TET)、復(fù)方新諾明(SXT)、萬(wàn)古霉素(VAN)、左旋氧氟沙星(LEV)和慶大霉

3、素(GEN)12種抗菌藥物的耐藥性及β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率的變遷，分析比較三種葡萄球菌的甲氧西林耐藥菌株和甲氧西林敏感菌株對(duì)上述抗菌藥物的耐藥率。
　　 2．對(duì)2005年1月-2007年5月間本實(shí)驗(yàn)室保存并存活的490株金黃色葡萄球菌、301株表皮葡萄球菌和130株溶血葡萄球菌采用頭孢西丁紙片擴(kuò)散法和mecA基因檢測(cè)證實(shí)甲氧西林耐藥菌株；用紙片擴(kuò)散法篩選莫匹羅星耐藥葡萄球菌，并用微量肉湯法檢測(cè)莫匹羅星耐藥菌株的最小抑菌濃度(MIC)

4、，確定其耐藥水平。統(tǒng)計(jì)分析莫匹羅星藥菌株對(duì)慶大霉素、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素和萬(wàn)古霉素藥物敏感性。
　　 3．通過(guò)高水平耐藥基因mupA基因的擴(kuò)增及對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序、比對(duì)，探討莫匹羅星高水平耐藥機(jī)制。
　　 結(jié)果：
　　 1．2005年～2007年在臨床各類(lèi)標(biāo)本中共檢出724株金黃色葡萄球菌，358株表皮葡萄球菌和197株溶血葡萄球菌。三種葡萄球菌主要來(lái)自痰液標(biāo)本，占所有標(biāo)本39

5、．7％～62．2％。膿液、留置導(dǎo)管、尿液和血液標(biāo)本也占了一定的比例。從科室分布來(lái)看，三種葡萄球菌主要集中于神經(jīng)內(nèi)外科和ICU。2005年～2007年間MRS的檢出率為80．1％(1024/1279)。MRSA的分離率有增長(zhǎng)趨勢(shì)，由2005年的63．8％上升到2007年的74．5％。雖然MRSE的分離率有所下降，但一直在86．3％以上，MRSH的比例基本穩(wěn)定在95．0％左右。
　　 2．三種葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率均在95．0

6、％以上。未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素耐藥菌株。金黃色葡萄球菌對(duì)氨芐西林/舒巴坦、克林霉素、紅霉素、頭孢唑啉、苯唑西林、青霉素、四環(huán)素、左旋氧氟沙星和慶大霉素耐藥率高>57．0％，且三年的高耐藥率基本保持不變，對(duì)復(fù)方新諾明耐藥率較低(25．6％)；表皮葡萄球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物(氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、苯唑西林和青霉素)具有高耐藥性，耐藥率>90．0％，利福平與左旋氧氟沙星較敏感，耐藥率分別為19．6％和21．2％。三年間大部分藥物的耐藥性基本穩(wěn)定

7、，除克林霉素的耐藥率由2005年的50．5％逐漸下降到2007年的29．8％。溶血葡萄球菌對(duì)利福平與四環(huán)素較為敏感外，對(duì)其它9種抗菌藥物的耐藥率均在63．5％以上。
　　 3．11種抗菌藥物中，僅萬(wàn)古霉素未發(fā)現(xiàn)耐藥株。MRSA對(duì)除復(fù)方新諾明外的9種抗菌藥物的耐藥率>63．5％，顯著高于MSSA(P<0．01)，MRSA和MSSA對(duì)復(fù)方新諾明耐藥率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0．05)，耐藥率分別為23．9％和29．4％。MRSE對(duì)10種抗

8、菌藥物的耐藥率均不同程度高于MSSE(P<0．01)，對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物(氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑琳和青霉素)均達(dá)100．0％。對(duì)利福平和左旋氧氟沙星最低，為21．5％和23．4％。MRSH對(duì)氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑琳和紅霉素的耐藥率高于MSSH(P<0．01)，對(duì)其余7種抗菌藥物的耐藥率兩者無(wú)差異(P>0．05)。10種抗菌藥物中，MRSH對(duì)利福平和四環(huán)素的耐藥率較為敏感，分別為10．1％和26．5％。對(duì)其余抗菌藥物的耐藥率介于6

9、4．6％～100．0％之間。
　　 4．921株葡萄球菌中共篩選出莫匹羅星耐藥株91株，耐藥率為9．9％，其中金黃色葡萄球菌對(duì)莫匹羅星耐藥率為5．5％(27/490)，表皮葡萄球菌耐藥率為10．3％(31/301)，溶血葡萄球菌耐藥率為25．4％(33/130)。表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌都以2006年為最低，而溶血葡萄球菌則相反，以2006年為最高。91株莫匹羅耐藥菌中檢出82株高水平(MuH)耐藥菌株(金黃色葡萄球菌22株

10、，表皮葡萄球菌27株，溶血葡萄球菌33株)，占90．1％，而低水平(MuL)耐藥9株(金黃色葡萄球菌5株，表皮葡萄球菌4株)，占9．9％。耐藥菌株主要來(lái)源于痰液標(biāo)本，莫匹羅星耐藥金黃色葡萄球菌集中于燒傷科，而表皮葡萄球菌與溶血葡萄球菌以ICU為主。在82株莫匹羅星MuH耐藥菌株中均檢有mupA基因，而在9株MuL耐藥菌株中未檢到該基因。頭孢西丁與mecA基因檢測(cè)結(jié)果一致：91株莫匹羅星耐藥葡萄球菌中，MRS有68株，占74．7％。在82

11、MuH菌株中，MRS占76．8％(63/82)，而在MuL菌株中，MRS占55．6％(5/9)。MRS在MuH菌株和MuL菌株的分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0．05)。
　　 5．莫匹羅星耐藥菌僅對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥率為0．0％。27株莫匹羅星耐藥金黃色葡萄球菌對(duì)頭孢西丁、慶大霉素、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、利福平、紅霉素、克林霉素和四環(huán)素8種抗菌藥物均具有高耐藥率(>66．7％)，多重耐藥株達(dá)88．9％，并有12株對(duì)除萬(wàn)古霉素外的8種抗菌

12、藥物全部耐藥，且MuH和MuL對(duì)9種抗菌藥物的耐藥率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0．05)。表皮葡萄球菌對(duì)利福平敏感，耐藥率為9．7％，對(duì)其余抗菌藥耐藥率介于35．5％～74．2％，多重耐藥株達(dá)61．3％(19/27)。除復(fù)方新諾明對(duì)MuH耐藥率高與MuL(P<0．05)外，其余7種抗菌藥物兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)差異(P>0．05)。溶血葡萄球菌對(duì)利福平和四環(huán)素都較為敏感，耐藥率為15．2和21．2％。對(duì)其余6種抗菌藥物均表現(xiàn)為高耐藥率，多重耐藥株達(dá)100

13、％(33/33)。
　　 結(jié)論
　　 1．臨床分離的葡萄球菌標(biāo)本分布以痰液為主，并主要集中于以神經(jīng)內(nèi)外科和ICU為主。MRS的檢出率高。
　　 2．葡萄球菌β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率高。對(duì)大部分的抗菌藥物耐藥情況嚴(yán)重。MRS對(duì)絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率不同程度高于MSS。未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素耐藥菌株。
　　 3．莫匹羅星耐藥葡萄球菌己在我院臨床分離株中出現(xiàn)，檢出率為9．9％。莫匹羅星耐藥菌在CNS更為流行。耐藥菌株中，以