炎癥因子對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞表達(dá)IL-17R的影響.pdf

1、目的：探討人重組炎癥因子(inflammatorycytokines)對(duì)體外培養(yǎng)的人非小細(xì)胞肺癌A549和H460細(xì)胞株白介素17受體(interleukin17R,IL-17R)表達(dá)水平的影響。
　　方法：分別用不含或者含有不同濃度或兩兩組合的人重組炎癥因子(LPS、TNF-a、IL-6、IL-8、IL-1β)的RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)A549、H460兩種細(xì)胞株,然后進(jìn)行:(1)定量RT-PCR法檢測(cè)炎癥因子作用后A549

2、、H460細(xì)胞表達(dá)IL-17RmRNA的水平。(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)炎癥因子刺激A549、H460細(xì)胞后IL-17R膜蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：發(fā)現(xiàn):(1)用不同濃度或兩兩組合的人重組炎癥因子處理6h后,A549細(xì)胞的IL-17RmRNA的表達(dá):在IL-8(10pg/ml)、TNF-a+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)、LPS+IL-8(10pg/ml+100ng/ml)、LPS+IL-1β(100ng/ml+0.1ng

3、/ml)、IL-1β+IL-6(0.1ng/ml+10pg/ml)、IL-1β+IL-8(0.1ng/ml+10pg/ml)、IL-6+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)較對(duì)照組增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在TNF-a(100pg/ml、1ng/ml)、LPS(10ng/ml)、IL-1β(1ng/ml)較對(duì)照組下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),IL-6各濃度(10pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、1ng/ml

4、、10ng/ml、100ng/ml)均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);H460細(xì)胞的IL-17RmRNA的表達(dá):在IL-6(1ng/ml;10ng/ml;100ng/ml)、TNF-a(1ng/ml;10ng/ml;100ng/ml)、TNF-a+LPS(100ng/ml+10ng/ml)、TNF-a+IL-1β(100ng/ml+1ng/ml)、TNF-a+IL-6(100ng/ml+100ng/ml)、LPS+IL-6(10ng/

5、ml+100ng/ml)較對(duì)照組增高明顯有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而在IL-8(10ng/ml、100ng/ml)、TNF-a(50pg/ml)、IL-1β(0.01ng/ml)、IL-1β+IL-8(1ng/ml+10pg/ml)、IL-6+IL-8(100ng/ml+10pg/ml)較對(duì)照組下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),LPS各濃度(10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.

6、05)。
　　(2)我們選用以上能使A549、H460細(xì)胞表達(dá)IL-17RmRNA增高的炎癥因子濃度來(lái)刺激這兩種細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)來(lái)測(cè)定其膜蛋白的表達(dá)量,其結(jié)果如下:A549細(xì)胞的IL-17R膜蛋白的表達(dá):在TNF-a+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)、IL-1β+IL-6(0.1ng/ml+10pg/ml)IL-17R膜蛋白的增高較對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與其基因表達(dá)相吻合,而其余四個(gè)濃度IL-17R膜蛋白的

7、表達(dá)較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),并沒(méi)隨基因表達(dá)增高而增高。H460細(xì)胞的IL-17R膜蛋白的表達(dá):在TNF-a(100ng/ml)、TNF-a+IL-1β(100ng/ml+1ng/ml)、TNF-a+IL-6(100ng/ml+100ng/ml)、LPS+IL-6(10ng/ml+100ng/ml)IL-17R膜蛋白的表達(dá)較對(duì)照組增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其他濃度較對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

8、　　結(jié)論：(1)單個(gè)炎癥因子體外刺激A549、H460細(xì)胞;IL-8(10pg/ml)能促進(jìn)A549細(xì)胞IL-17RmRNA的表達(dá),LPS、TNF-a、IL-1β均在特定濃度抑制其mRNA的表達(dá),IL-6各濃度對(duì)其基因的表達(dá)無(wú)影響。TNF-a、IL-6的高濃度能夠促進(jìn)H460細(xì)胞IL-17RmRNA的表達(dá),IL-8、IL-1β在特定濃度抑制其基因的表達(dá),LPS各濃度對(duì)其基因的表達(dá)無(wú)影響。(2)我們選用每種炎癥因子的最適濃度(基因表達(dá)趨勢(shì)