HIF-1α與CTGF在腹膜透析大鼠腹膜組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：
　　 腹膜透析((peritoneal dialysis,PD)是終末期腎臟病(end-stage renaldisease,ESRD)患者的首選治療方法之一,因?yàn)樗哂辛己玫臍堄嗄I功能保護(hù)作用、心血管事件發(fā)生率低、操作方便、血源性疾病的感染風(fēng)險(xiǎn)小、花費(fèi)較少、患者生活質(zhì)量較高等優(yōu)點(diǎn)。然而,隨著腹膜透析時(shí)間的延長(zhǎng),患者的腹膜功能將逐漸喪失,其中超濾衰竭(ultrafiltration failure,UFF)的發(fā)生是

2、患者腹膜功能喪失的主要原因。有資料顯示:PD超過(guò)6年的患者UFF發(fā)生率可高達(dá)36％,已成為PD患者被迫退出腹膜透析的主要原因。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外腹膜透析超濾衰竭研究的熱點(diǎn)主要集中在腹膜組織新生血管形成及腹膜纖維化的發(fā)生機(jī)制及防治方面。
　　 缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是細(xì)胞及系統(tǒng)中氧穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的重要調(diào)節(jié)因子,近年來(lái)越來(lái)越受到重視,在腎外傷、馬兜鈴酸腎病、腎透明細(xì)胞癌、腫瘤等疾病

3、中均發(fā)現(xiàn)HIF-1α表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn):在低氧或正常氧條件下,HIF-1α可控制體內(nèi)的結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growthfactor,CTGF)等多種靶基因轉(zhuǎn)錄活性,從而調(diào)節(jié)血管新生、組織纖維化等機(jī)體的病理生理過(guò)程。
　　 最近的研究也發(fā)現(xiàn)慢性腎臟病(Chronic kidney disease,CKD)腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生過(guò)程中存在缺血、缺氧,HIF-1α在腎臟異常表達(dá),并且發(fā)現(xiàn)HIF-1α可以誘導(dǎo)腎

4、小管上皮細(xì)胞表達(dá)CTGF。腹膜透析患者腹膜是否表達(dá)HIF—1α及CTGF,從而導(dǎo)致腹膜纖維化的發(fā)生?因此,本研究擬通過(guò)建立尿毒癥大鼠腹膜透析模型,模擬人體內(nèi)腹透過(guò)程,選取HIF-1α[及CTGF、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smoothmuscle actin,α-SMA)為檢測(cè)指標(biāo),觀察它們?cè)诟鼓そM織中的表達(dá),并探討HIF-1α、CTGF在UFF發(fā)生中的作用,從而為臨床防治腹膜超濾衰竭的發(fā)生,維持長(zhǎng)期有效的腹膜透析提供新的思路。<

5、br>　　 方法：
　　 32只清潔級(jí)、雄性SD大鼠,體重在180-200g之間,隨機(jī)分為四組:A:正常對(duì)照組(n=8只)；B:假手術(shù)組(n=8只):C:尿毒癥組(5／6腎切除組:n=8只):D:尿毒癥腹膜透析組(4.25％PD組:n=8只)。行5／6腎切除術(shù)建立尿毒癥大鼠模型,此基礎(chǔ)上再建立腹膜透析模型。D組大鼠每日每只給予4.25％的腹透液規(guī)律腹透28天。28天腹膜透析結(jié)束后,處死所有大鼠并留取適量新鮮腹膜組織,分別采用免

6、疫組織化學(xué)法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法,檢測(cè)大鼠腹膜組織中HIF-1α、CTGF蛋白及mRNA的表達(dá),α-SMA染色觀察各組大鼠腹膜纖維化的程度。
　　 結(jié)果：
　　 1、各組大鼠腹膜組織均表達(dá)HIF-1α、CTGF。與正常組比較,假手術(shù)組HIF-1α、CTGF蛋白及mRNA表達(dá)上調(diào),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與正常組及假手術(shù)組比較,尿毒癥組及腹膜透析組HIF-1α、CTGF蛋白及mRNA表達(dá)上調(diào)