氯沙坦鉀對腹膜透析大鼠腹膜纖維化組織中TLR4表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分：大鼠腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化模型的建立及TLR4在腹膜組織中的表達(dá)
　　 目的：探討TLR4、IL-6、IL-8在4.25％葡萄糖腹膜透析液誘導(dǎo)的大鼠腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化模型形成過程中的動態(tài)變化及意義。
　　 方法：40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組(n=10)、2周模型組(n=10)、4周模型組(n=10)和6周模型組(n=10)。模型組每日給予腹腔注射4.25％葡萄糖腹膜透析液(100ml/kg)，分

2、別于2周、4周、6周時殺檢大鼠行腹膜平衡實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)確量取超濾量，留取0和4小時血清與腹腔流出液標(biāo)本，計(jì)算葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量，腹膜組織分別行HE及Masson染色，測量腹膜厚度，用光鏡觀察壁層腹膜組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。臟層腹膜組織用間接免疫熒光的方法檢測TLR4、IL-6、IL-8的蛋白表達(dá)水平。正常對照組正常喂養(yǎng)，六周時殺檢。
　　 結(jié)果：正常腹膜組織被覆了一層間皮細(xì)胞，與正常對照組比較，2周模型組光鏡下可見壁層腹膜組織已有明顯的增厚，同時伴隨

3、有超濾量的下降(P＜0.01)與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量的增加(P＜0.01)；4周組與6周組腹膜厚度進(jìn)一步增加，超濾量下降與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量增加更明顯。四周與六周組之間腹膜厚度、超濾量、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。免疫熒光結(jié)果顯示：與正常對照組比較，2周、4周和6周模型組腹膜組織中TLR4、IL-6、IL-8蛋白水平的表達(dá)明顯增強(qiáng)(P＜0.01)，但4周模型組與6周模型組之間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　

4、結(jié)論：腹腔內(nèi)注射4.25％葡萄糖腹膜透析液4周可成功誘導(dǎo)符合臨床特征的腹膜纖維化模型，TLR4、IL-6、IL-8參與了大鼠腹膜纖維化的發(fā)生發(fā)展，這為進(jìn)一步探討氯沙坦鉀改善腹膜纖維化機(jī)制奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 第二部分：氯沙坦鉀對腹膜透析大鼠腹膜纖維化模型腹膜組織中TLR4表達(dá)的影響
　　 目的：觀察氯沙坦鉀對腹膜纖維化大鼠腹膜組織中TLR4、IL-6、IL-8表達(dá)的影響。
　　 方法：30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為

5、正常對照組、腹膜透析纖維化大鼠組(模型組)、氯沙坦鉀治療組(治療組)，每組各10只。正常對照組無任何干預(yù)；模型組每日給予4.25％腹膜透析液腹腔注射(100ml/kg)；治療組每日4.25％葡萄糖腹膜透析液腹腔注射(100ml/kg)，并予氯沙坦鉀片每日灌胃(30mg/kg)，于4周末同時殺檢各組大鼠，做腹膜平衡試驗(yàn)，準(zhǔn)確量取超濾量，留取0和4小時血清與腹腔流出液標(biāo)本，計(jì)算葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量，4小時后，取壁層腹膜組織作形態(tài)學(xué)觀察，臟層腹膜組織

6、用免疫熒光的方法檢測TLR4、IL-6、IL-8水平的表達(dá)。
　　 結(jié)果：腹膜組織學(xué)檢查顯示：與模型組比較，氯沙坦鉀治療后大鼠壁層腹膜厚度明顯減薄(P＜0.01)，超濾量增加(P＜0.01)，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)量下降(P＜0.01)；模型組腹膜組織中TLR4、IL-6、IL-8蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)，而治療組腹膜組織中TLR4、IL-6、IL-8蛋白表達(dá)明顯下調(diào)。
　　 結(jié)論：氯沙坦鉀能夠下調(diào)腹膜纖維化大鼠腹膜組織中TLR4、IL-6