氯沙坦抗大鼠肝纖維化的實驗研究.pdf

1、目的:
　　 建立并研究CCL4誘導(dǎo)的肝炎肝纖維化的動物模型，在開始階段即給予低于降壓劑量的氯沙坦（10mg/kg）進(jìn)行干預(yù)治療，觀察大鼠肝功轉(zhuǎn)氨酶指標(biāo)、大鼠肝臟的病理改變、膠原沉積與膠原變化的情況以及與肝纖維化密切相關(guān)的主要細(xì)胞因子的變化，研究氯沙坦對CCL4誘導(dǎo)的大鼠肝臟纖維化的影響，并進(jìn)一步探討氯沙坦抗大鼠肝纖維化的可能作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 健康Wistar雄性大鼠40只，體質(zhì)量(220±20)g

2、，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為對照組（10只）、模型組(15只)及氯沙坦干預(yù)組（15只）;模型組和氯沙坦干預(yù)組大鼠均采用腹腔注射40％CCL4花生油溶液的方法復(fù)制大鼠肝纖維化模型，對照組注射同等劑量未添加CCL4的花生油，每隔3天1次，氯沙坦干預(yù)組給予氯沙坦(10mg/ kg)灌胃，1天1次，模型組和對照組灌以等劑量的生理鹽水，連續(xù)6周。造模結(jié)束后分別取血和肝組織，取血清測定肝功指標(biāo);光鏡下觀察肝組織病理改變;偏振光顯微鏡下觀察肝組織纖維

3、化的程度;酶聯(lián)免疫吸附法測定血清TGF-β1、TIMP-1的水平;免疫組織化學(xué)方法檢測Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原的表達(dá);實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測大鼠肝組織中AngⅡ、AT1R、TGF-β1、TIMP-1 mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 對照組大鼠可見毛色潔白，精神狀態(tài)好，食欲佳，反應(yīng)靈敏;光鏡下可見肝小葉結(jié)構(gòu)完整，無膠原纖維增生，無肝細(xì)胞變性及壞死，肝功基本正常，偶可見Ⅰ型、Ⅲ型膠原的沉積，炎癥反應(yīng)輕，無纖維化。

4、>　　 模型組大鼠可見毛色變黃，色澤黯淡，消瘦明顯，動作遲緩，食欲減退;光鏡下可見正常肝小葉結(jié)構(gòu)消失，血管結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞脂肪變性、壞死嚴(yán)重，膠原纖維增生明顯，提示造模成功;肝功能差，Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原大量沉積，TGF-β1、TIMP-1的含量較對照組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;炎癥反應(yīng)、纖維化程度嚴(yán)重。
　　 氯沙坦干預(yù)組大鼠一般情況較模型組改善，食欲增加，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，消瘦不如模型組明顯，與模型組比較，氯沙坦干預(yù)組大鼠血

5、清AST、ALT、TGF-β1、TIMP-1的含量均明顯降低(p＜0.05)，Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原的表達(dá)明顯減少(p＜0.05， P＜0.05)，肝組織中AngⅡ、AT1R、TGF-β1、TIMP-1mRNA的表達(dá)降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 1、40％CCL4花生油溶液腹腔注射6周，成功復(fù)制了大鼠肝炎肝纖維化模型。
　　 2、氯沙坦干預(yù)治療后可抑制肝組織的炎癥反應(yīng)，減輕肝纖維化的程度，其機(jī)制可能