全反式維甲酸對(duì)大鼠腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化的防治作用.pdf

1、目的：腹膜透析是終末期腎病患者的一項(xiàng)重要替代治療手段，而腹膜纖維化可導(dǎo)致腹膜結(jié)構(gòu)和功能的喪失，是患者退出腹膜透析的主要原因之一。近來(lái)較多的研究表明全反式維甲酸(ATRA)具有抗纖維化作用。本研究利用高糖誘導(dǎo)腹膜纖維化，給予ATRA進(jìn)行干預(yù)，觀察ATRA對(duì)腹膜透析所致腹膜纖維化的影響，并初步探討其延緩腹膜纖維化的相關(guān)機(jī)制，為臨床尿毒癥患者腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化的防治提供理論依據(jù)。 方法：將32只雄性SD大鼠隨機(jī)分為(1)對(duì)照組(

2、n=8)：每日腹腔注射0.9％生理鹽水10ml及與藥物等體積的磷酸鹽緩沖液(PBS)稀釋的二甲基亞砜(DMSO)；(2)模型組(n=8)：每日腹腔注射4.25％腹透液10ml及與藥物等體積的PBS稀釋的DMSO；(3)維甲酸小劑量干預(yù)組(A1組)(n=8)：每日腹腔注射4.25％腹透液10ml及全反式維甲酸2mg/kg；(4)維甲酸大劑量干預(yù)組(A2組)(n=8)：每日腹腔注射4.25％腹透液10ml及全反式維甲酸5mg/kg。所有大鼠

3、每日自由進(jìn)食、飲水，環(huán)境保持通風(fēng)、恒溫(20-25℃)、安靜。在實(shí)驗(yàn)第28天行1小時(shí)腹膜平衡實(shí)驗(yàn)(PET)，取血和腹透液標(biāo)本檢測(cè)透析液尿素濃度(D)、血漿尿素濃度(Purea)、初始腹透液葡萄糖濃度(D0)、透出液葡萄糖濃度(D1)，計(jì)算超濾量(UF)、D/Purea、D1/D0，以檢測(cè)腹膜功能；處死大鼠，取壁層及臟層腹膜組織進(jìn)行HE及Masson染色，觀察腹膜形態(tài)學(xué)變化；并通過(guò)免疫組織化學(xué)檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、結(jié)締組

4、織生長(zhǎng)因子(CTGF)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、膠原Ⅰ(COL-Ⅰ)在臟層腹膜的表達(dá)水平；實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)TGF-β1mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果：①1小時(shí)腹膜平衡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組與對(duì)照組、A1組、A2組相比，UF和D1/D0明顯減少(P<0.05)，D/Purea明顯增加(P<0.05)。A1和A2兩組之間亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與A1組相比，A2組大鼠的UF及D1/D0有所增加(P<0.05)。而A

5、2組與對(duì)照組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。②HE和Masson染色結(jié)果顯示，對(duì)照組腹膜薄而光滑，模型組腹膜均增厚，部分間皮細(xì)胞脫落，間皮下基質(zhì)明顯增厚；與模型組相比，ATRA治療組腹膜病變明顯減輕，且A2組病變較A1組輕。③免疫組化結(jié)果表明，TGF-β1、CTGF、α-SMA、COL-Ⅰ在對(duì)照組大鼠腹膜中無(wú)或僅有微量表達(dá)，而模型組各指標(biāo)的表達(dá)明顯高于其他各組(P<0.05)，A1組和A2組表達(dá)有所降低，但仍高于對(duì)照組(P<0.05)

6、，且A2組較A1組表達(dá)降低(P<0.05)。④RT-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組、A1組、A2組相比，模型組TGF-β1mRNA的表達(dá)明顯增高(P<0.05)，ATRA治療后其表達(dá)明顯降低，且兩組之間亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，A2組的表達(dá)低于A1組。 結(jié)論：①高糖可以誘導(dǎo)腹膜纖維化；②ATRA對(duì)腹膜透析相關(guān)性腹膜纖維化具有抑制作用，且呈劑量依賴性；③ATRA抑制腹膜纖維化的機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)TGF-β1、CTGF、α-SMA的