大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)及其分化為神經(jīng)元樣細胞的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 本研究通過建立大鼠BMSCs體外分離、純化的培養(yǎng)方法，觀察G-CSF對BMSCs增殖的影響，并對G-CSF和GDNF在BMSCs神經(jīng)細胞分化中作用進行探討。 方法: 1、無菌條件下采集2周齡SPF級SD大鼠的股骨和脛骨的骨髓細胞，使用含10％FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，從細胞貼壁性、免疫表型和脂肪分化三方面進行BMSCs鑒定： 2、MTT法測定G-CSF對BMSCs增殖的影響；

2、 3、取P5細胞，10ng/ml bFGF進行預誘導24h后，按GDNF和不同濃度的G-CSF組合分組(B1-5)進行成神經(jīng)元細胞誘導，并從細胞形態(tài)變化、RT-PCR對GFR-α1mRN,A表達水平進行檢測，鑒定誘導所得細胞； 4、統(tǒng)計學數(shù)據(jù)均用均數(shù)士標準差(-x±s)表示，采用SPSS13.0軟件處理，方法是單因素方差分析和g檢驗法，檢驗水準α=0.05。。 結(jié)論: 1、差速貼壁法可以有效地分離純化BMSCs；

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