OATP1B1與AML的臨床遺傳藥理學研究——人類基因組單體型圖(HapMap)的研究與應(yīng)用.pdf

1、人類基因組中的遺傳變異，是人體對藥物及其他外源性化合物產(chǎn)生不同反應(yīng)的重要原因。同時，在一定程度上，人類對大部分疾病的易感性也決定于人類基因中的各種變異。在過去的40年里，隨著分子生物學的發(fā)展，遺傳藥理學從一個小學科逐漸發(fā)展成為推動臨床藥理學進步的中堅力量，同時也成為生物醫(yī)藥研究中一個炙手可熱的領(lǐng)域。目前，人類基因組擁有超過一千萬個單核苷酸突變以及大量的其他類型的遺傳變異。在任何一項臨床研究中，只要經(jīng)費允許，我們都可以對超過一百萬個遺傳多

2、態(tài)性或者超過兩萬五千個基因的表達進行分析。盡管如此，目前這些工作仍沒能有效改變傳統(tǒng)的臨床治療模式，大部分的臨床藥物治療依然遵循經(jīng)驗用藥模式，但轉(zhuǎn)變正在悄然進行，相當多的臨床醫(yī)生已經(jīng)開始在日常醫(yī)療工作中考慮基因多態(tài)性的影響，如CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，TPMT以及VKORC1等。更明顯的是，遺傳藥理學已經(jīng)改變了臨床藥物研發(fā)的要求和模式。遺傳藥理學準則已經(jīng)成為許多大型藥物臨床研究的基本要求。美國食品藥品管理局（FDA）也鼓

3、勵臨床試驗者提供實驗藥物的相關(guān)遺傳藥理學資料1。 自2002年開始人類基因組單體型圖計劃（InternationalHapMapProject）正式啟動。由這項由美國、日本、英國、加拿大、中國和尼日利亞的科學家們合作的，從人類基因組計劃延續(xù)而來的項目，旨在開發(fā)一個面向公眾的，人類全基因組單體型數(shù)據(jù)庫2。該數(shù)據(jù)庫的信息將用來指導各種遺傳研究以及臨床表型相關(guān)的研究3。HapMap計劃所研究的DNA樣本為來自不同地域，不同種族的270

4、個個體。到Ⅱ期數(shù)據(jù)發(fā)布時，共分析了三百多萬個SNP，分析密度達到了每1kb序列中分析1個SNP。這大概覆蓋了九百萬到一千萬個常見SNP中的25％～35％。目前，其數(shù)據(jù)也已經(jīng)可以通過互聯(lián)網(wǎng)無償獲得。 基于以上研究背景，本課題旨在查明有機陰離子轉(zhuǎn)運體OATP1B1的常見遺傳多態(tài)性對他汀類降脂藥物阿托伐他汀代謝動力學的影響，以及通過競爭性抑制和非競爭性抑制，改變OATP1B1轉(zhuǎn)運能力后，阿托伐他汀以及羅素他汀藥代動力學的改變。此外，通

5、過嚴格設(shè)計的臨床實驗，應(yīng)用HapMap數(shù)據(jù)庫提供的基因單體型信息，考察多基因，多遺傳變異以及多個單體型，對接受阿糖胞苷標準化療的急性髓細胞樣白血?。ˋML）患者臨床預后和藥物療效的影響進行研究。本課題不僅為藥物反應(yīng)個體差異提供分子水平的解釋，還為臨床遺傳藥理學開辟新的研究方法和研究方向。 本課題的主要研究結(jié)果如下： 1.證實在中國健康人群中，OATP1B1單體型顯著影響阿托伐他汀在不同個體中的血藥濃度。OATP1B1*5

6、突變攜帶者與OATP1B1*1a/*1a相比，阿托伐他汀血藥濃度顯著升高； 2.發(fā)現(xiàn)單劑量口服600mg利福平，可顯著抑制阿托伐他汀的肝攝取。OATP1B1單體型顯著影響利福平對阿托伐他汀肝臟攝取的抑制效應(yīng)。利福平抑制作用在OATP1B1*1a/*1a個體中較OATP1B1*5突變攜帶者中更顯著。 3.連續(xù)14天服用熊脫氧膽酸膠囊，血漿羅素他汀及膽紅素水平顯著升高。這可能是由于熊脫氧膽酸通過抑制轉(zhuǎn)錄因子HNF1α，進而抑

7、制OATP1B1活性所致。這種抑制水平要相對低于直接抑制OATP1B1轉(zhuǎn)運。由于熊脫氧膽酸所抑制的轉(zhuǎn)錄因子HNF1α能參與調(diào)節(jié)多種藥物代謝酶的表達，臨床應(yīng)用熊脫氧膽酸時，應(yīng)注意可能通過此機制產(chǎn)生的多種藥物相互作用。 4.研究了參與阿糖胞苷體內(nèi)代謝的多種代謝酶（CDA，dCK），轉(zhuǎn)運體（hCNT1）的多個單核苷酸變異以及單體型對接受阿糖胞苷標準化療的急性髓細胞樣白血病（AML）患者的總體生存率，無事件生存率，無復發(fā)生存率等臨床預后

8、指標的影響。結(jié)果證實，hCNT1，1561C>T（rs2242046）遺傳變異，與完全緩解組AML患者的總體生存率以及藥物毒性反應(yīng)顯著相關(guān)。此外，在出現(xiàn)藥物治療失效以及治療早期死亡患者中，骨髓移植以及加用全反式維甲酸可顯著改善患者的總體生存率。 5.首次將人類基因組單體型圖（HapMap）數(shù)據(jù)應(yīng)用于臨床研究，并證實，在候選基因已知的情況下，HapMap數(shù)據(jù)庫能有效指導臨床遺傳藥理學研究，并提供有力的數(shù)據(jù)分析工具。 總之，