
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1、目的:觀察中波紫外線輻射對(duì)體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT細(xì)胞)產(chǎn)生IL-6的影響,H1受體阻滯劑導(dǎo)丙嗪與H2受體阻滯劑法莫替丁有否及如何抑制上述作用.方法:1.將培養(yǎng)的單層融合的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HaCaT細(xì)胞以胰酶消化后,臺(tái)盼藍(lán)拒染法計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),以濃度為10<'6>/ml左右接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板,待細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)70﹪~80﹪融合,吸去培養(yǎng)液,以0、100、300、600J/m<'2>的中波紫外線輻射,輻射后每孔均加入培養(yǎng)液300μ1,
2、分別于輻射后2、4、8、12、24和48h收集上清液.2.將培養(yǎng)的HaCaT細(xì)胞輻射300J/m<'2>劑量的中波紫外線后,立即加入最終濃度分別為0、10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>、10<'-8>mol/L的導(dǎo)丙嗪,分別于4、12和24h收集上清液.3.將培養(yǎng)的HaCaT細(xì)胞輻射300J/m<'2>劑量的中波紫外線后,立即加入最終濃度分別為0、10<'-4>、10<'-5>、10<'-6>、10<'-7>mol/L濃度,
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