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1、目的:觀察腦靈湯對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠行為學(xué)、海馬組織形態(tài)學(xué)、海馬CA3區(qū)GFAP和IL-1β蛋白表達(dá)的影響,初步探討腦靈湯對(duì)AD模型大鼠的治療作用及其可能的作用機(jī)制。 方法:將經(jīng)Y型迷宮測(cè)試篩選后入選的40只SD大鼠完全隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、中藥組和西藥組。采用Aβ1-42注射大鼠海馬制作AD大鼠模型,Y迷宮試驗(yàn)和Morris水迷宮測(cè)定大鼠造模后三周的學(xué)習(xí)記憶成績(jī),取腦組織作冰凍切片,剛果紅染色觀察大鼠海馬是否有β
2、-淀粉樣蛋白的沉積,HE染色、Nissl染色觀察大鼠海馬組織形態(tài)學(xué)改變。免疫組化法觀察GFAP、IL-1β在大鼠海馬CA3區(qū)組織神經(jīng)元中的表達(dá)。 結(jié)果:(1)Y迷宮實(shí)驗(yàn)中,與假手術(shù)組和正常組比較,模型組大鼠學(xué)會(huì)躲避所需的電刺激次數(shù)明顯增多(p<0.05),與模型組比較,經(jīng)藥物干預(yù)后,中藥、西藥兩治療組大鼠表現(xiàn)為所需的電刺激次數(shù)減少(p<0.05),且兩治療組相比無(wú)顯著性差異。(2)Morris水迷宮隱匿平臺(tái)搜索實(shí)驗(yàn)中,與假手術(shù)組
3、和正常組比較,模型組大鼠表現(xiàn)為逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(p<0.05);探索實(shí)驗(yàn)中,正常組和假手術(shù)組動(dòng)物的平均穿越次數(shù)最多,中藥組和西藥組動(dòng)物穿越次數(shù)又多于模型組,比較有顯著差異(p<0.05)。(3)剛果紅染色:光鏡下,正常組、假手術(shù)組大鼠海馬切片未見(jiàn)橘紅色淀粉樣沉積,海馬背側(cè)細(xì)胞帶排列整齊。模型組大鼠Aβ1-42注射部位的海馬切片上可見(jiàn)橘紅色斑塊狀淀粉樣沉積,提示海馬組織區(qū)有A B沉淀,且模型組海馬背側(cè)細(xì)胞帶明顯損傷,局部神經(jīng)元大段缺失,
4、并出現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。(4)光鏡觀察顯示,假手術(shù)組和正常組大鼠海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞排列緊密整齊,無(wú)明顯神經(jīng)元脫失;模型組大鼠海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞排列稀疏、紊亂,神經(jīng)元脫失明顯,可見(jiàn)膠質(zhì)細(xì)胞增生,且正常錐體細(xì)胞數(shù)目較正常組和假手術(shù)組比較明顯減少(p<0.05);中、西藥治療組大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元脫失現(xiàn)象明顯減輕,錐體細(xì)胞形態(tài)較正常,排列較整齊,接近假手術(shù)組。(5)GFAP免疫組化結(jié)果顯示,各組大鼠海CA3區(qū)域GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較,模型組
5、最多,中藥組和西藥組高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(6)IL-1β免疫組化結(jié)果顯示,各組大鼠海馬CA3區(qū)IL-1β陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較,模型組最多,中藥組和西藥組高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組大鼠海馬CA3區(qū)灰度值比較,模型組顯著低于假手術(shù)組和正常組的灰度值(p<0.05);中藥組和西藥組大鼠海馬CA3區(qū)灰度值較模型組顯著增加(p<0.05)。 結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明采用Aβ
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