健腦益智湯治療阿爾茨海默病大鼠的實驗研究.pdf

1、目的：建立復合式阿爾茨海默病(AD)大鼠模型，觀察健腦益智湯對AD大鼠的學習記憶能力、膽堿酯酶活力、氧化應激、細胞凋亡和神經(jīng)病理學的影響情況，探討健腦益智湯治療AD的作用機制及療效。 方法：1、AD大鼠模型的制備。老年大鼠加左側(cè)側(cè)腦室一次性注射聚集態(tài)的Aβ25-35建立復合式加大鼠模型。 2、復方健腦益智湯治療AD大鼠的療效及作用機制研究。選取正常老年大鼠，隨機分為正常組、模型組、安理申組和健腦益智湯大、中、小劑量組。各

2、組按規(guī)定劑量灌胃1周后，除正常組外，其余各組左側(cè)側(cè)腦室一次性注射5μl聚集態(tài)的Aβ25-35。造模7天后進行Morris水迷宮行為學檢測。灌胃滿3周后，腹主動脈取血測血清AchE、BchE和SOD活力及MDA含量，斷頭取腦，分別取左側(cè)額葉、顳葉和海馬組織，進行Aβ免疫組化染色及銀染；分離右側(cè)前1/4大腦皮質(zhì)，進行流式細胞儀細胞凋亡檢測；右側(cè)后1/4大腦皮質(zhì)，制成腦組織勻漿測MDA、NO含量和SOD活力。 結(jié)果：1、復合式AD模型

3、組逃避潛伏期較正常組明顯延長，并且腦組織Aβ免疫組化染色可見膠質(zhì)細胞內(nèi)的Aβ沉積、腦實質(zhì)的類SP和腦皮質(zhì)的CAA等結(jié)構，同時銀染結(jié)果可見不典型NFTs和大量的星形膠質(zhì)細胞。 2、Morris水迷宮檢測顯示：健腦益智湯大、中劑量組和安理申組水迷宮逃避潛伏期均小于模型組(P＜0.01)，而三組間無明顯差異，并且大、中劑量組平臺象限游泳路徑長度占總路徑長度的百分比大于模型組，且有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。 3、模型組AchE

4、、BchE活力明顯高于正常組(P＜0.01)，各用藥組較模型組AchE、BchE活力均有降低，并且在降低AchE活力時，安理申作用最明顯(P＜0.01)，而在降低BchE活力時，各用藥組無差別。 4、模型組具有典型的自由基變化，即MDA含量增高(P＜0.01)，SOD活力降低；健腦益智湯大、中劑量組較安理申組降低MDA含量更明顯(P＜0.05)，而各用藥組大鼠在增加SOD活力時，無明顯差異。 5、模型組腦皮質(zhì)NO含量較正

5、常組減少；健腦益智湯大、中劑量組較模型組NO含量明顯增加(P＜0.01)，并且較安理申組NO含量亦明顯增加(P＜0.01)。 6、模型組細胞凋亡率明顯高于正常組(P＜0.01)，各用藥組細胞凋亡率明顯降低，并且安理申組和健腦益智湯大、中劑量組較模型組降低明顯(P＜0.01)，而三者間無明顯差異。7、模型組海馬、額葉和顳葉的平均灰度值最低，說明Aβ的沉積量最多，而安理申組和健腦益智湯大、中劑量組平均灰度值明顯增高，則說明Aβ的沉積

6、量減少(P＜0.01)，并且三組間無明顯差異，同時發(fā)現(xiàn)用藥之后，各組腦實質(zhì)中類SP、膠質(zhì)細胞均減少，而皮質(zhì)的CAA無變化。 結(jié)論：1、復合式AD模型，基本模擬了AD學習記憶能力減退、膽堿酯酶活性增強、自由基改變、膠質(zhì)細胞炎癥反應和類SP、CAA及神經(jīng)元缺失等病理學特征，更符合AD臨床特點。 2、健腦益智湯對Aβ所致AD大鼠模型學習記憶障礙具有明顯改善，并與安理申療效相似。3、健腦益智湯同安理申一樣具有降低膽堿酯酶活性的作