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1、沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)植物沙棘為胡頹子科(Elaeagnaceae)沙棘屬(Hippophae),是一種落葉性灌木,為我國(guó)西部地區(qū)最具代表性的經(jīng)濟(jì)作物之一。其生物資源蘊(yùn)藏量豐富,多樣性廣泛。沙棘為藥食同源植物,它的葉、莖、根和果,特別是沙棘的果實(shí)含有豐富的生物活性物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。其中,從沙棘的籽中提取所得的蛋白,含量豐富,氨基酸種類齊全,含有人體所需的全部必需氨基酸,是一種優(yōu)良的植物蛋白資源。
2、> 本文以沙棘籽為原料,采用酸沉堿提的方法來制備沙棘籽蛋白。利用高脂飲食結(jié)合鏈脲佐菌素(STZ)來誘導(dǎo),獲得2型糖尿病動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀J褂蒙臣鞍走M(jìn)行灌胃處理小鼠4周,探究其對(duì)小鼠體重(BW)、空腹血糖水平(FBG)、血脂水平和肝臟損傷的影響,用于研究沙棘蛋白對(duì)糖尿病小鼠的降血脂作用;檢測(cè)各個(gè)時(shí)期小鼠糞便的pH值和腸道優(yōu)勢(shì)菌群的數(shù)量變化,考察沙棘籽蛋白對(duì)糖尿病小鼠腸道環(huán)境和腸道菌群的影響;同時(shí)用半定量PCR方法(RT-PCR)研究對(duì)脂肪
3、酸代謝mRNA表達(dá)水平的影響,初步探究沙棘籽蛋白改善糖尿病脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理。利用16s rDNA測(cè)序技術(shù)對(duì)小鼠糞便全基因組進(jìn)行分離分類,考察沙棘蛋白對(duì)糖尿病小鼠腸道微生物菌群的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,采用堿提酸沉的工藝制備沙棘籽蛋白,其含量為78.6%,總提取率為37.4%。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示:沙棘蛋白處理組較模型組小鼠的體重、空腹血糖、總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)與糖尿病組相比有顯著降
4、低(p<0.05);高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)較糖尿病組則明顯升高。此外,RT-PCR結(jié)果顯示,沙棘籽蛋白使小鼠肝臟組織基因CCATT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(CEBPα)、脂肪酶合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧化酶(ACC1),肉堿?;D(zhuǎn)移酶(CPT1)的表達(dá)量增加,降低胰島素抵抗,改善糖尿病小鼠癥狀。培養(yǎng)得到的腸道微生物中,沙棘蛋白處理組的雙歧桿菌(Bifidobacterium)、乳酸桿菌(Lactobacillus)、擬桿菌(Bacte
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