生防酵母(Candida diversa)形態(tài)變化及金屬離子提高其發(fā)酵生物量和生防效力的研究.pdf

1、新鮮水果產(chǎn)品是人們必不可少的營養(yǎng)來源，在國民經(jīng)濟中起著舉足輕重的作用。然而由于病原菌侵染水果，引起腐爛造成巨大的經(jīng)濟損失。目前水果采后病害的主要防治措施仍是使用化學農(nóng)藥，但化學農(nóng)藥對人類健康、生態(tài)環(huán)境和食品安全產(chǎn)生的不利影響正越發(fā)受到人們的關注。近年來，使用生物拮抗菌防治水果采后病害是替代化學農(nóng)藥防治的安全有效措施之一。
　　本課題以酵母拮抗菌（Candida diversa）為研究對象，酵母拮抗菌在形態(tài)上的變化（從酵母單細胞形態(tài)

2、到生物膜形態(tài)）是基于酵母菌的生物防治系統(tǒng)中一種新的作用模式。探索出酵母拮抗菌產(chǎn)生形態(tài)變化的條件，酵母單細胞形態(tài)和生物膜形態(tài)的C.diversa對熱逆境和氧化逆境的耐受性以及對蘋果、獼猴桃灰霉病防治效果的影響。同時為獲得較大生物量的拮抗酵母菌應用到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，本課題也進行拮抗酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化。通過響應面設計實驗探索出發(fā)酵培養(yǎng)基三種關鍵金屬離子(Mg2+、Fe2+、Zn2+)對拮抗酵母菌生物量和存活率影響的研究，對比不同金屬離子濃度對發(fā)

3、酵中的拮抗酵母菌的存活率和生理生化特性的影響。主要結論如下:
　　(1)酵母拮抗菌產(chǎn)生形態(tài)變化的條件:當拮抗酵母菌C.diversa從瓊脂含量為2％的YPD培養(yǎng)基轉移到瓊脂含量為0.3％的YPD培養(yǎng)基時，其形態(tài)由酵母形態(tài)轉變?yōu)樯锬ば螒B(tài)。
　　(2)與酵母單細胞形態(tài)相比，生物膜形態(tài)的C.diversa對熱逆境和氧化逆境的耐受性以及對蘋果、獼猴桃灰霉病的防治效果有著顯著地增強。
　　(3)拮抗酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化:通過單

4、因素試驗和響應面試驗，對拮抗酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)基金屬離子含量進行優(yōu)化。培養(yǎng)基關鍵離子含量最佳條件為:Mg2+為1511.13 mg/L，F(xiàn)e2+濃度為2.16 mg/L，Zn2+濃度為26.77 mg/L，有效生物量為5.28 g。
　　(4)實驗表明初始培養(yǎng)基金屬離子濃度對C.diversa的存活率、生物量積累和生理生化有著十分重要的影響。與MM（最小礦物培養(yǎng)基）和Lack(Mg2+、Fe2+和Zn2+三種離子缺失)實驗組相比，Be

5、st（響應面優(yōu)化Mg2+、Fe2+和Zn2+三種離子濃度）實驗組有著較高的生物量、存活率和生防效力，同時其抗氧化酶活性較高并且蛋白損傷和脂質氧化程度較低。經(jīng)優(yōu)化的培養(yǎng)基可以顯著提高C.diversa的抗逆能力和生防效力。
　　研究結果表明，當YPD培養(yǎng)基瓊脂含量由2％變成0.3％時，拮抗酵母菌C.diversa酵母形態(tài)可以轉變?yōu)樯锬ば螒B(tài)，生物膜形態(tài)的C.diversa對逆境的耐受性以及對蘋果灰霉病的防治效果有著顯著增強，Mg2+