生防菌株MT-06生防機(jī)制及開(kāi)發(fā)利用研究.pdf

1、生物防治作為防治植物病害的重要措施，因其與環(huán)境友好、維持生態(tài)平衡、有利于人類健康等優(yōu)點(diǎn)，受到越來(lái)越多研究者的關(guān)注和重視。菌株MT-06(Talaromycesflavus)是從草莓炭疽病標(biāo)樣上分離獲得的一株具有很好生防效果的真菌菌株，本文對(duì)它的生物學(xué)特性、生防機(jī)制及田間防效進(jìn)行了研究，為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.選用13種常見(jiàn)病原菌與MT-06菌株平板對(duì)峙培養(yǎng)，測(cè)定MT-06菌株的抑菌譜；采用

2、單因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，分別測(cè)定不同培養(yǎng)基成分、溫度、pH和光照間隔處理對(duì)MT-06菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)及產(chǎn)孢的影響；經(jīng)PCR擴(kuò)增克隆鑒定了MT-06菌株的ITS和β-tubulin序列，結(jié)合形態(tài)觀察，對(duì)MT-06菌株進(jìn)行了菌種鑒定。結(jié)果表明：MT-06具有廣譜抗菌性，對(duì)多種病原菌具有拮抗作用；該生防菌營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的最適條件是PDA或PSA培養(yǎng)基，初始pH為5，28～35℃，24小時(shí)全光照培養(yǎng)；在查氏培養(yǎng)基上，25～28℃，24小時(shí)全光照條件下孢子產(chǎn)量最高

3、。經(jīng)形態(tài)觀察和ITS序列及β-tubulin序列分析，將菌株MT-06鑒定為Talaromyces.flavus。
　　 2.構(gòu)建了2個(gè)熒光表達(dá)載體pGFP和pRFP，并通過(guò)ATMT方法將pGFP轉(zhuǎn)化到MT-06菌株和稻瘟病菌中，將pRFP轉(zhuǎn)化到草莓炭疽病菌中，經(jīng)過(guò)幾輪驗(yàn)證，確定GFP和RFP基因已經(jīng)成功插入到目的真菌的基因組中，但是熒光在MT-06菌株和草莓炭疽病菌中表達(dá)較弱。同時(shí)，通過(guò)將MT-06菌株與草莓炭疽病菌進(jìn)行玻片對(duì)

4、峙培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)有菌絲纏繞現(xiàn)象。
　　 3.研究了MT-06發(fā)酵液對(duì)10種病原菌的抑制效果及其熱穩(wěn)定性，結(jié)果表明，MT-06發(fā)酵液對(duì)多種病原菌具有抑制作用，對(duì)高溫高壓也有較好的耐受性，說(shuō)明MT-06菌株可以產(chǎn)生外泌物質(zhì)抑制病原菌的生長(zhǎng)。
　　 4.研究了MT-06菌液對(duì)草莓炭疽病和白粉病的田間防治效果，及其對(duì)草莓苗炭疽病枯死率和產(chǎn)苗量的影響，并測(cè)定了MT-06在草莓苗上的定殖能力。結(jié)果表明，MT-06對(duì)草莓炭疽病和白粉病具有