大鼠脊髓膠質(zhì)細(xì)胞在癌痛中的功能活動(dòng)變化及電針緩解癌痛作用觀察.pdf

1、癌痛即惡性腫瘤引起的疼痛，是臨床上常見的慢性病理性疼痛之一，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量。據(jù)統(tǒng)計(jì)資料表明，腫瘤患者中約有30-50％伴有輕到中度的疼痛，而在腫瘤晚期或轉(zhuǎn)移性腫瘤患者中，約有75-95％的患者伴有嚴(yán)重的疼痛而需要接受治療。依據(jù)WHO倡導(dǎo)的三階梯療法，即根據(jù)疼痛程度不同給予非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥和/或阿片類藥物治療，取得了一定的成效。但是由于目前各種療法的局限性，仍有大約45％的癌痛患者的疼痛得不到有效控制。因此，建立適宜的癌痛動(dòng)物

2、模型，為研究癌痛機(jī)理及尋找新的能有效緩解癌痛的方法奠定基礎(chǔ)，這是當(dāng)前慢性痛研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。 研究證明，癌痛時(shí)脊髓背角強(qiáng)啡肽免疫陽性神經(jīng)元增加，同側(cè)脊髓背角星形膠質(zhì)細(xì)胞顯著增生，這一現(xiàn)象在炎癥痛模型中非常罕見，在神經(jīng)痛模型上只有外周神經(jīng)嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)才會(huì)出現(xiàn)。以往研究提示癌痛是一種機(jī)理獨(dú)特的慢性痛。越來越多的證據(jù)表明，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與慢性痛密切相關(guān)。一方面，膠質(zhì)細(xì)胞在主要的痛覺傳遞物質(zhì)谷氨酸的代謝、攝取、合成、清除中起重要作用，另一

3、方面，膠質(zhì)細(xì)胞釋放的致炎細(xì)胞因子(IL-1β、IL一6、TNF-α等)、前列腺素等是引起痛覺傳遞神經(jīng)元敏化的主要因素，促進(jìn)中樞敏化形成。因此，膠質(zhì)細(xì)胞在痛覺的初級(jí)傳入和整合中起重要作用，在痛覺調(diào)制尤其是慢性痛中樞敏化的形成與維持中起著舉足輕重的作用。那么膠質(zhì)細(xì)胞在癌痛時(shí)到底有何變化是本課題研究的一個(gè)問題。 針刺鎮(zhèn)痛是祖國醫(yī)學(xué)的精華之一，具有作用廣，毒副作用小，經(jīng)濟(jì)簡便等優(yōu)點(diǎn)。國內(nèi)外大量研究表明，針刺對急性痛和慢性痛都有一定的鎮(zhèn)痛

4、作用。臨床實(shí)踐初步提示，應(yīng)用針刺于癌痛病人，不僅能夠鎮(zhèn)痛，還能通過針刺調(diào)節(jié)癌癥患者的免疫功能，從而有助于提高癌癥患者的生活質(zhì)量。但是長期以來，由于缺乏合適的癌痛實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，阻礙了對癌痛機(jī)理的研究，也就影響了新的有效的癌痛治療方法的研究，包括一些癌痛新藥及針刺等非藥物療法等。直到1998年，Wacnik等首先報(bào)道了小鼠癌痛模型，而后又有多個(gè)癌痛實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型相繼問世。這些癌痛動(dòng)物模型的出現(xiàn)為開展中西醫(yī)結(jié)合針刺及針?biāo)幗Y(jié)合治療癌痛提供了契機(jī)。

5、 綜上所述，本論文擬開展下列研究： 1．建立癌痛動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?(1)參照。Medhurst等報(bào)道的大鼠脛骨癌痛模型，改良、建立新的大鼠脛骨癌痛模型，通過測定模型大鼠體重、脛骨病理、脛骨X光片、后肢熱痛覺過敏、機(jī)械性痛覺超敏(觸誘發(fā)痛)、雙側(cè)后肢負(fù)重能力以及自發(fā)性疼痛，對模型進(jìn)行綜合評(píng)估； (2)建立新的大鼠跟骨癌痛模型，通過測定后肢熱痛覺過敏、機(jī)械性痛覺超敏等對模型進(jìn)行評(píng)估； (3)參照文獻(xiàn)，建立

6、小鼠皮膚癌痛模型，通過測定小鼠腳掌皮膚黑色素瘤腫脹周長、熱痛覺過敏對模型進(jìn)行評(píng)估； 2．觀察癌痛時(shí)大鼠脊髓背角膠質(zhì)細(xì)胞功能活動(dòng)變化，探討膠質(zhì)細(xì)胞在癌痛中的作用 (1)運(yùn)用免疫組織化學(xué)、Western Blot、RT-PCR等形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)檢測大鼠脛骨癌痛時(shí)脊髓背角星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記蛋白GFAP的表達(dá)變化； (2)運(yùn)用免疫組織化學(xué)、Western Blot、RT-PCR等形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)檢測大鼠脛骨癌痛

7、時(shí)脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記蛋白CD11b的表達(dá)變化； (3)運(yùn)用RT-PCR方法檢測大鼠脛骨癌痛時(shí)脊髓背角少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記蛋白MOSP的表達(dá)變化； (4)運(yùn)用RT-PCR和ELISA方法檢測大鼠脛骨癌痛時(shí)脊髓背角致炎細(xì)胞因子IL一1β、IL-6、TNF-α的表達(dá)變化； (5)運(yùn)用RT-PCR方法檢測大鼠脛骨癌痛時(shí)脊髓背角Toll樣受體(Toll likereceptor，TLR)的表達(dá)變化； 3．觀察電針和