過敏性紫癜腎炎患兒外周血Fas水平的表達及意義.pdf

1、背景與目的：過敏性紫癜腎炎(AnaphylactoidPurpuranephritis,Henoch-Schonleinpurpuranephritis,HSPN)是兒科常見的繼發(fā)性腎小球疾病，其發(fā)病率逐年增加，轉歸與腎病理類型密切相關，是小兒慢性腎功能衰竭的主要病因之一，嚴重危害兒童健康。HSPN發(fā)病機制尚未清楚，近年來隨著細胞生物學、分子生物學以及醫(yī)學免疫學的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)細胞凋亡參與其發(fā)??；細胞凋亡(apoptosis)是指在一定生理

2、或病理條件下，細胞按自身規(guī)律嚴格有序地主動結束其生命的死亡過程。死亡誘導因子(Factorasscioatedsuicide，F(xiàn)as)/死亡誘導因子配體(Factorasscioatedsuicideligend，F(xiàn)asL)系統(tǒng)是引發(fā)細胞凋亡(Apoptosis)的重要途徑之一，F(xiàn)as為Ⅰ型跨膜蛋白，屬于腫瘤壞死因子(tumornecerosisfactor，TNF)超家族，廣泛分布于T、B淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞等免疫細胞以及肝

3、、腎、肺等器官的實質細胞上；FasL是細胞表面Ⅱ型跨膜蛋白，屬TNF家族，F(xiàn)asL主要分布于活化的T淋巴細胞、自然殺傷細胞以及腎臟的系膜細胞、上皮細胞、成纖維細胞中。Fas/FasL系統(tǒng)主要參與機體免疫細胞的陰性及陽性選擇，調節(jié)機體免疫應答以及參與殺傷T細胞(celltoxiclymphocyte,CTL)的細胞毒作用。 已有大量資料顯示淋巴細胞凋亡異常參與了系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風濕性關節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性硬化(MA)等

4、自身免疫性疾病的發(fā)病。新近的資料表明，在多種腎臟疾病中，包括IgA腎病、急性腎衰、移植腎排異等，均發(fā)現(xiàn)Fas/FasL介導的細胞凋亡參與它們的發(fā)病，而國內外關于細胞凋亡在HSPN的發(fā)病研究的較少。為此，本實驗觀察了HSPN患兒外周血T淋巴細胞凋亡率、T淋巴細胞膜和中性粒細胞Fas陽性表達率以及血清可溶性Fas(solubleFactorassociatedsuicide，sFas)和可溶性Fas配體(solubleFactorassoc

5、iatedsuicide，sFasL)水平的改變，研究它們在HSPN發(fā)病中所起的作用，為臨床診斷提供檢驗指標，為臨床治療及預后評估提供理論基礎。 方法：1.選擇HSPN組患兒70例(男48例，女22例，年齡3-15歲(9.18±2.88)，其中腎臟病理類型Ⅱ型(單純系膜增生病變)26例，Ⅲ型(系膜增生伴新月體形成＜50％)33例，Ⅳ型(系膜增生伴新月體50％-75％)11例；正常對照組32例(男17例，女15例)，年齡3-12歲

6、(6.79±3.28)；2.采用流式細胞術檢測HSPN組和正常對照組外周血T淋巴細胞凋亡率、T淋巴細胞膜以及中性粒細胞膜Fas陽性表達率；3.應用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清sFas及sFasL表達水平。 結果：(1)外周血T淋巴細胞凋亡率、中性粒細胞膜及T淋巴細胞膜Fas陽性表達率：HSPN患兒外周血T淋巴凋亡率、T淋巴細胞膜Fas表達水平增高，與正常對照組比較具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01,P＜0.01)；HSPN患兒

7、外周血中性粒細胞膜Fas表達水平顯著高于正常對照組，兩組之間比較具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；HSPN組病理改變Ⅲ型患兒外周血T淋巴細胞Fas表達率高于Ⅱ型(P＜0.01)，Ⅳ型患兒外周血T淋巴細胞Fas表達率高于Ⅱ型、Ⅲ型(P＜0.01，P＜0.01)；(2)血清sFas、sFasL含量變化：HSPN組外周血清sFas、sFasL表達水平明顯高于正常對照組，兩組之間比較具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；(3)HSPN組外周血T淋巴凋亡

8、率、T淋巴細胞膜、中性粒細胞膜Fas表達情況以及血清sFas含量、FasL含量之間的相關性分析：HSPN外周血T淋巴細胞凋亡率與T淋巴細胞Fas陽性表達率呈正相關(r=0.782,P＜0.01)；HSPN組外周血T淋巴細胞膜Fas陽性表達率與中性細胞膜Fas陽性表達率呈正相關(r=0.686，＜0.01)；HSPN患兒血清sFas含量與sFasL含量呈正相關(r=0.731,P＜0.01)；HSPN組患兒T淋巴細胞Fas表達率與血清sF

9、as含量呈正相關(r=0.666，P＜0.01)；HSPN患兒外周血中性細胞膜Fas陽性表達率與血清sFas含量呈正相關(r=0.560,P＜0.01)；腎小球病變等級的增加與T淋巴細胞膜Fas表達水平呈正相關(r=0.848,P＜0.01)。 結論：(1)HSPN患兒急性期外周血T淋巴凋亡率、T淋巴細胞膜、中性粒細胞膜Fas表達水平明顯高于正常對照組，表明在HSPN患兒存在淋巴細胞、中性粒細胞凋亡亢進。(2)HSPN患兒急性期

10、外周血清sFas表達水平增高可能源于T淋巴細胞膜、中性粒細胞膜Fas的高表達，提示HSPN患兒存在細胞凋亡亢進，同時伴有sFas水平增高可為機體保護性反應。(3)HSPN患兒外周血T淋巴細胞膜Fas增高水平與腎小球病理改變嚴重程度呈正相關。(4)HSPN患兒血清sFasL表達水平增高，且T淋巴細胞Fas陽性表達率與血清sFasL呈正相關，表明HSPN患兒存在淋巴細胞凋亡亢進。(5)淋巴細胞及中性粒細胞凋亡亢進及其引發(fā)的凋亡的淋巴細胞及中