普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床療效觀察及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床觀察
　　 目的:觀察普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床療效及安全性。
　　 方法:給68例通過臨床和輔助檢查診斷的難治性嬰幼兒血管瘤患兒給予普萘洛爾，1.0～2.0mg/kg/d，分2～3次口服，每月復(fù)診1次觀察和記錄血管瘤大小、質(zhì)地、顏色的變化等，并隨時(shí)處理治療過程中出現(xiàn)的不良反應(yīng)。按4級(jí)評(píng)分法對(duì)近期療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 結(jié)果:68例隨訪3～13個(gè)月，療效：Ⅰ級(jí)8

2、例，Ⅱ級(jí)：13例，Ⅲ級(jí)：29例，Ⅳ級(jí)：13例。68例均未發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)，但均未有1例完全消褪。
　　 結(jié)論;
　　 1.小劑量普萘洛爾(1～2mg/kg/d)治療難治性嬰幼兒血管瘤療效確切，不良反應(yīng)輕微，可作為難治性嬰幼兒血管瘤的首選治療藥物，治療的劑量及療程宜個(gè)體化，服藥、停藥時(shí)宜逐增、逐減。
　　 2.嬰幼兒難治性血管瘤經(jīng)口服普萘洛爾治療后皮損不能完全消退，局部可出現(xiàn)疤痕、色脫等，所以診斷一旦明確，宜盡早治

3、療，必要時(shí)可結(jié)合局部治療去除殘余病變組織。
　　 目的:通過研究普萘洛爾對(duì)HUVEC-12細(xì)胞(Human UmbilicalVein Endothelial cells)分泌VEGF(Vascular Endothelial GrowthFactor)的影響以及相關(guān)的信號(hào)通路，進(jìn)一步探討普萘洛爾治療難治性血管瘤的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　 方法:以離體培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC-12)為模型，用濃度分別為16ug/

4、ml、8ug/ml、4ug/ml、2ug/ml、1ug/ml、0ug/ml(空白對(duì)照)的普萘洛爾干預(yù)，采用ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液(cultural supernatants，CS)中 VEGF的濃度。用MTT法檢測(cè)VEGF促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的最佳濃度，建立陽(yáng)性系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上用Western印跡法檢測(cè)不同濃度普萘洛爾干預(yù)后p-JNK(磷酸化的JNK)和p-P38(磷酸化的P38)的表達(dá).
　　 結(jié)果:
　　

5、 1.不同濃度普萘洛爾組的細(xì)胞毒作用
　　 在細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)中HUVEC-12細(xì)胞在接受不同濃度的普萘洛爾干預(yù)后，MTT檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組比較，不同濃度的普萘洛爾對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞毒作用均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
　　 2.不同濃度普萘洛爾組CS中VEGF的濃度普萘洛爾干預(yù)組CS中VEGF的濃度在16ug/ml，8ug/ml，4ug/ml，2ug/ml，1ug/ml與空白對(duì)照組相比均下降(P<0.05)，有

6、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在普萘洛爾濃度為8ug/ml時(shí)下降最明顯。
　　 3.不同濃度的VEGF對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖影響
　　 在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中HUVEC-12細(xì)胞在接受為40ng/ml，20ng/ml，10ng/ml，5ng/ml，2.5ng/ml的VEGF干預(yù)48h后，與空白對(duì)照組相比，VEGF對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞有促進(jìn)增殖的作用，當(dāng)濃度為20ng/ml時(shí)最為明顯(P<0.001)。
　　 4.普萘洛爾干預(yù)組中p-JN

7、K和p-P38的表達(dá)：
　　 p-JNK和p-P38信號(hào)均先增強(qiáng)后減弱，P-Jnk在普萘洛爾濃度為1ug/ml表達(dá)最明顯，而P-P38在普萘洛爾濃度為4ug/ml時(shí)表達(dá)最明顯，在普萘洛爾濃度為16ug/ml時(shí)兩者都有下降。
　　 結(jié)論：
　　 1.普萘洛爾對(duì)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌VEGF有抑制作用，在濃度為8 ug/ml時(shí)對(duì)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌VEGF的抑制作用最明顯。
　　 2.P38、JNK激酶在普萘洛爾影響H