CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷過(guò)程中與細(xì)胞增殖、凋亡及代謝相關(guān)分子的動(dòng)態(tài)變化.pdf

1、目的：研究CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷過(guò)程中與細(xì)胞增殖、凋亡及代謝相關(guān)分子的動(dòng)態(tài)變化，并探討其作用的可能機(jī)制。
　　方法：試驗(yàn)共分為10組：正常對(duì)照組1組；CCl4模型組9組（CCl4溶于橄欖油中，濃度為0.1％，腹腔注射0.1mL/10g），分別在造模后3，6，12，24，30，36，42，48，54h時(shí)取材。檢測(cè)上述10組小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ alanine aminotransferase，ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移

2、酶（aspartate aminotransferase， AST）活性的變化趨勢(shì)；各組小鼠肝組織的病理切片檢測(cè)；用Western blotting法檢測(cè)各組小鼠肝組織PCNA、Bcl-2、Bax、CYP1A2、CYP2E1、CYP3A4、TNF-α、IL-6和HSP70蛋白的表達(dá)以及變化趨勢(shì)。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSSl3.0軟件包，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean± SD）表示，顯著性分析采用ANOVA，組間比較采用Duncan’s te

3、st進(jìn)行分析處理，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：和對(duì)照組小鼠相比較，模型組小鼠血清ALT和AST水平均顯著升高(P<0.05)，在36h達(dá)到高峰。肝損傷之后，小鼠肝臟失去其正常結(jié)構(gòu)，在36h肝組織損傷最為顯著。CCl4誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷3，6，12，24，30，36，42，48，54h之后肝PCNA、Bcl-2、Bax、CYP1A2、CYP2E1、CYP3A4、TNF-α、IL-6和HSP70蛋白的表達(dá)均呈明顯變化趨

4、勢(shì)(P<0.05)。PCNA在CCl4處理后3h至24h明顯降低，從30h時(shí)升高，到42h達(dá)到最高點(diǎn)，然后又逐漸降低，54h時(shí)向正常水平恢復(fù)。Bcl-2在CCl4處理后明顯降低，在24h時(shí)達(dá)到最低點(diǎn)，然后開(kāi)始升高但未恢復(fù)至正常水平，到48h和54h又再次降低；Bax在CCl4處理后先升高，在12h達(dá)到高峰，然后降低，并逐漸向正常水平恢復(fù)。CYP1A2和CYP3A4在CCl4處理后3h時(shí)均明顯降低，然后開(kāi)始升高但未恢復(fù)至正常水平，到48h

5、和54h又再次降低；CYP2E1在CCl4處理后先升高，在12h達(dá)到高峰，然后降低，在30h達(dá)到最低點(diǎn)，此后逐漸向正常水平恢復(fù)。HSP70在CCl4處理后3h至12h先升高，24h時(shí)降低，30h達(dá)到最低點(diǎn)，然后再升高。IL-6在CCl4處理后3h至12h逐漸降低，24h時(shí)升高，30h達(dá)到最高點(diǎn)，然后又逐漸降低，54h時(shí)仍高于正常水平；TNF-α在CCl4處理后先逐漸升高，30h達(dá)到高峰，然后又逐漸降低，但54h時(shí)并未恢復(fù)至正常水平。

6、r>　　結(jié)論：
　　1.小鼠染毒CCl4后，血清ALT和AST活性水平明顯升高，肝組織結(jié)構(gòu)有不同程度的損傷。在36h時(shí)，上述2種酶活性水平最高，組織結(jié)構(gòu)損傷最明顯，肝損傷最嚴(yán)重。
　　2. CCl4誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷后肝組織PCNA、Bcl-2、Bax、CYP1A2、CYP2E1、CYP3A4、TNF-α、IL-6和HSP70蛋白的表達(dá)均呈明顯變化趨勢(shì)，這9種分子在此過(guò)程中可能起到重要作用。
　　3.本課題組首次發(fā)現(xiàn)人