利多卡因?qū)?nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠腹腔巨噬細(xì)胞HMGB1表達(dá)的影響.pdf

1、目的: 通過觀察不同濃度的利多卡因?qū)PS誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá)和蛋白釋放的影響，探討利多卡因的抗炎作用機(jī)制，為膿毒癥的臨床治療提供理論參考。 方法: 取雄性Wistar大鼠腹腔巨噬細(xì)胞，置6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)3～5天后，用LPS刺激，采用不同濃度的利多卡因進(jìn)行干預(yù)。共分為5組。5組細(xì)胞均棄原培養(yǎng)液，用不含血清的培養(yǎng)液洗滌2遍后：（1）空白對照組（C組）加入無血清的RPMI-1640培養(yǎng)液2.0m

2、l；（2）陽性對照組（LPS組）加入無血清的RPMI-1640培養(yǎng)液1.980ml和濃度為10ng/ul的LPS 20ul，使LPS的終濃度為100ng/ml；（3）利多卡因1-3組（Lido1-Lido3組）在加入無血清的RPMI-1640培養(yǎng)液1.960ml和濃度為10ng/ul的LPS 20ul后，再分別加入濃度為0.2ug/ul、2ug/ul、20ug/ul的利多卡因20ul，LPS的終濃度為100ng/ml，利多卡因的終濃度分

3、別為2ug/ml、20ug/ml、200ug/ml。5組細(xì)胞均于孵育箱中培養(yǎng)24h后收取細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)物上清。采用RT-PCR和ELISA分別檢測細(xì)胞HMGB1 mRNA的表達(dá)和細(xì)胞培養(yǎng)物上清HMGB1蛋白濃度。 結(jié)果: RT-PCR與ELISA結(jié)果顯示，與陽性對照組（LPS組）比較，不同濃度利多卡因組HMGB1 mRNA表達(dá)和HMGB1蛋白釋放均有不同程度減少，且呈劑量依賴性。利多卡因組1與LPS組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.

4、01），而利多卡因2組及利多卡因3與LPS組及利多卡因1組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。利多卡因2與利多卡因3組之間HMGB1 mRNA表達(dá)的差異也有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01），但抑制HMGB1蛋白釋放的差異則無統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。 結(jié)論: 終濃度為20ug/ml，200ug/ml的利多卡因可明顯抑制LPS誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞HMGB1 mRNA的表達(dá)和蛋白釋放。這可能是利多卡因抗炎作用的機(jī)制之一。