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文檔簡介
1、目的:
檢測病毒性心肌炎小鼠不同時間點外周血中半乳糖苷凝集素蛋白(Galectin-9,Gal-9)的含量及心肌組織中Gal-9 mRNA及其受體Tim-3 mRNA的表達,探討Gal-9在病毒性心肌炎發(fā)生發(fā)展中的作用。
方法:
選用58只5~6周齡健康雄性Balb/c小鼠,體重為16~18g,隨機分為病毒組(n=50)和對照組(n=8),病毒組小鼠腹腔接種0.10ml TCID50為10-5/
2、L的Nancy株柯薩奇病毒B3(CVB3)病毒液,分別于接種后第7d、10d、14d、28d隨機處死8只;對照組小鼠腹腔接種0.10ml不含病毒的Eagle氏液,28d時處死。取小鼠心肌組織采用HE染色,在光鏡下觀察心肌病理變化,計算心肌組織病理學積分;采用實時熒光定量PCR(RQ-PCR)檢測心肌組織中Gal-9 mRNA與Tim-3mRNA的表達。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測外周血中Gal-9的含量。
結(jié)果:
3、
1.病毒組小鼠接種CVB3后心肌炎的發(fā)病率為100%。光鏡下可見心肌細胞變性、壞死和部分心肌纖維斷裂,炎細胞浸潤,呈現(xiàn)典型的病毒性心肌炎病變。
2.病毒組小鼠感染CVB3后外周血中Gal-9的含量升高,10d時達高峰,14d時開始下降,28天時基本降至正常。
3.與對照組比較,病毒組小鼠外周血中Gal-9含量在第7、10、14d均明顯升高(F=16.64,p<0.01)。
4.病
4、毒組小鼠外周血中Gal-9的含量與心肌組織病理積分呈正相關(guān)(r=0.75,p<0.05)。
5.病毒組小鼠感染CVB3后心肌組織中Gal-9 mRNA的表達在第7d時升高,10d時達高峰,14d時開始下降,28d時基本降至正常。
6.與對照組比較,病毒組小鼠7d、10d時心肌組織中Gal-9 mRNA的表達均明顯增強(F=3.94,p<0.01)。
7.病毒組小鼠心肌組織中Gal-9 mRNA的
5、表達與心肌組織病理積分呈正相關(guān)(r=0.74,p<0.05)。
8.病毒組小鼠外周血中Gal-9的含量與心肌組織中Gal-9 mRNA的表達呈正相關(guān)(r=o.71,p<0.05)。
9.與對照組比較,第7d、10d、14d時小鼠心肌組織中Tim-3 mRNA的表達均明顯增強(F=20.58,p<0.05)。
10.病毒組小鼠感染CVB3病毒后心肌組織中Tim-3 mRNA的表達增強,10d時達高
6、峰,14d時開始下降,28d時基本降至正常。
11.病毒組小鼠心肌組織中Tim-3 mRNA的表達與心肌組織病理積分呈正相關(guān)(r=0.68,p<0.05)。
結(jié)論:
1.小鼠感染柯薩奇病毒B3后急性期外周血中Gal-9的含量升高,心肌組織中Gal-9 mRNA與Tim-3 mRNA的表達增強,表明Gal-9及其受體Tim-3在病毒性心肌炎的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。
2.病毒組小鼠外周
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