熱休克條件下誘導(dǎo)型HSP70對(duì)人胚肺二倍體細(xì)胞衰老的影響.pdf

1、研究目的：探討在熱休克條件下，人胚肺二倍體細(xì)胞MRC-5株誘導(dǎo)型熱休克蛋白70(HSP70)在細(xì)胞水平的表達(dá)機(jī)制，以及對(duì)MRC-5細(xì)胞衰老的影響。 方法：用熱休克處理誘導(dǎo)MRC-5細(xì)胞HSP70的表達(dá)，同時(shí)采用HSP70反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染MRC-5細(xì)胞做對(duì)照，分別置42℃恒溫水浴30min、1h、2h、4h，及每日水浴1h共3d和5d，各組細(xì)胞均在37℃復(fù)溫，于復(fù)溫后4h固定。流式細(xì)胞儀測(cè)定誘導(dǎo)型HSP70的表達(dá)及細(xì)胞凋亡，黃嘌呤

2、氧化酶法測(cè)定細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)總活力，衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色及顯微鏡觀察并采圖。 結(jié)果：(1)在熱休克條件下的不同時(shí)相，MRC-5細(xì)胞誘導(dǎo)型HSP70的表達(dá)隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng)而增加，且均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 (2)在熱休克條件下的不同時(shí)相，MRC-5細(xì)胞SOD總活力隨熱處理時(shí)間延長(zhǎng)而增高，均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。