油菜內(nèi)生真菌CanS-34A抗真菌物質(zhì)的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、內(nèi)生菌(endophytes)指的是在其生活史的部分或者全數(shù)階段寄生于植物的組織內(nèi)部，但不對(duì)植物造成危害的微生物。其中，內(nèi)生真菌因其增強(qiáng)植物抗病性、產(chǎn)生活性代謝產(chǎn)物等作用，近年來(lái)成為尋找生防菌株的寶庫(kù)。本研究對(duì)一株油菜內(nèi)生真菌CanS-34A進(jìn)行了分類(lèi)屬性鑒定，對(duì)其產(chǎn)生的抗真菌物質(zhì)進(jìn)行了防治油菜菌核病效果評(píng)估，以及化學(xué)結(jié)構(gòu)解析。取得的研究結(jié)果如下:
　　1.明確了菌株CanS-34A的分類(lèi)屬性
　　采用形態(tài)特征觀察和分子（I

2、TS、RPB2、CaM及benA）鑒定方法，發(fā)現(xiàn)菌株CanS-34A屬于Aspergillus capensis。
　　2.明確了菌株CanS-34A代謝產(chǎn)物防治油菜菌核病效果
　　通過(guò)平板對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)、發(fā)酵液抑制生長(zhǎng)試驗(yàn)、離體及活體葉片接種等試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)菌株CanS-34A對(duì)核盤(pán)菌的拮抗性，其代謝產(chǎn)物能抑制核盤(pán)菌的菌絲擴(kuò)展和菌核萌發(fā)，抑制核盤(pán)菌侵染。
　　3.明確了菌株CanS-34A抗真菌物質(zhì)的基本性質(zhì)
　　菌

3、株CanS-34A抗真菌物質(zhì)在60℃以下可保持活性，對(duì)紫外線(xiàn)輻射有一定的忍耐力，在堿性條件下活性較高。能特異性的抑制核盤(pán)菌科病原真菌（Sclerotinia屬、Botrytis屬和Monilinia屬）及革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。
　　4.從CanS-34A發(fā)酵液分離獲得3種抗真菌化合物
　　采用硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、HPLC等方法對(duì)菌株CanS-34A抗真菌物質(zhì)進(jìn)行了分離和純化，進(jìn)而采用核磁共振和高分辨

4、率質(zhì)譜等方法對(duì)化合物純品進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定。發(fā)現(xiàn)所獲得的3種化合物為penicillither、methyldichloroasterrate和rosellichalasin。生物活性測(cè)定結(jié)果表明，這些化合物對(duì)核盤(pán)菌（Sclerotinia sclerotiorum）、三葉草核盤(pán)菌（Sclerotinia trifoliorum）、灰葡萄孢（Botrytiscinerea）及桃褐腐（Monilinia fructicola）均表現(xiàn)出抑制效