天麻內(nèi)生真菌的分離鑒定及藥物化學(xué)的初步研究.pdf

1、目前，關(guān)于藥用植物資源保護(hù)的研究中，藥用植物的內(nèi)生真菌已經(jīng)成為藥用植物資源研究的一個新熱點。由于內(nèi)生真菌的次級代謝產(chǎn)物中含有與藥用植物相同或相似的生物活性物質(zhì),所以研究藥用植物內(nèi)生真菌多樣性，利用內(nèi)生真菌發(fā)酵生產(chǎn)藥物具有相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢。
　　本文首先對內(nèi)生真菌的國內(nèi)外研究概況及其研究意義進(jìn)行了綜述。從內(nèi)生真菌的分布、生物多樣性、代謝物質(zhì)的多樣性到內(nèi)生真菌的生物學(xué)作用做了介紹,并且對天麻及應(yīng)用價值做了簡單概述。
　　本文以我國傳統(tǒng)

2、中藥——天麻(Gastrodia elata Bl)為實驗材料，對天麻內(nèi)生真菌的菌群組成及活性成分進(jìn)行初步研究。取得以下結(jié)果：
　　1、內(nèi)生真菌的分離鑒定：采用組織印跡培養(yǎng)法,對產(chǎn)自貴州、四川、陜西、云南等地天麻的不同組織進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離，并確定如何區(qū)分組織內(nèi)生真菌與表面附生菌的方法。實驗結(jié)果表明，天麻內(nèi)生真菌分離的表面消毒以75％酒精和0.1％升汞結(jié)合的方法較好。在所試條件下共計分離得到94株內(nèi)生真菌。對其中分離純化的64株真

3、菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定結(jié)果結(jié)合鑒定，分屬于4個亞門、6綱、8目、11科、15屬。鑒定結(jié)果在一定程度上反應(yīng)了天麻內(nèi)生真菌的生物多樣性。采集于不同地區(qū)的天麻中均分離到了一定數(shù)量、不同類群的內(nèi)生真菌，表明內(nèi)生真菌在天麻體內(nèi)廣泛存在。
　　天麻不同組織部位內(nèi)生真菌的種類存在著一定的差異。塊莖中鑒定的43株真菌分布于12個屬（占27.9％），花莖中鑒定的10株菌分布于5個屬（占50％），花中鑒定的7株菌分布于4個屬（57.1％），果實

4、中鑒定的4株菌分布于3個屬（75％）。
　　本試驗還對同一季節(jié)不同地點來源的天麻塊莖內(nèi)生真菌進(jìn)行了研究，其數(shù)量和種類存在著差異。數(shù)量上貴州大方的優(yōu)勢菌群為刺盤孢屬(Colletotrichum sp.)，占總數(shù)的16％；貴州畢節(jié)和四川廣元的優(yōu)勢菌群是鏈格孢屬(Alternaria sp.)，分別是4株和5株，占總數(shù)的16％和20％。種類上，四川廣元的內(nèi)生真菌種類所占比例最高，共鑒定9株分布于5個屬，占55.6％。
　　2、產(chǎn)

5、天麻素內(nèi)生真菌的篩選：本文采用薄層層析TLC方法與高效液相色譜HPLC結(jié)合，從3株內(nèi)生真菌DF101（Chaetomium sp.）、BY302（Fusarium sp.）、SC108（Armillaria sp.）的發(fā)酵產(chǎn)物中檢出天麻素，DF101為0.057mg/g，BY302為0.089mg/g，SC108為0.184mg/g；對照品天麻中天麻素含量為1.038mg/g，約為最高含量SC108的6倍。這3株內(nèi)生真菌有2株來自塊莖，