應(yīng)用EMD進行重建的牙周組織對正畸力的應(yīng)答及其機理的研究.pdf

1、近年來，隨成人正畸患者的增加，臨床中牙根暴露、牙槽骨吸收等牙周組織喪失的病人越來越多。牙周組織是正畸牙移動的基礎(chǔ)，關(guān)系到矯治后牙列的平衡、功能和美觀。因此，如何為此類患者提供一種安全有效的治療方法，提高矯治質(zhì)量，已成為正畸醫(yī)生日趨關(guān)注的問題。 常規(guī)正畸時，對于健康牙周，適當?shù)臋C械刺激能改變細胞的形態(tài)，促進細胞的增殖分化以及功能的維持，牙周改建可處于動態(tài)平衡。對于有牙周組織喪失的患者，目前國內(nèi)外牙周領(lǐng)域的研究熱點是應(yīng)用釉基質(zhì)蛋白衍

2、生物(EnamelMatrix DerivafiveENID)進行牙周重建。其在歐洲、美國和日本的臨床應(yīng)用已顯示取得了較好的療效。但是應(yīng)用EMD進行牙周重建術(shù)后能否接受正畸治療，牙移動過程中其牙周組織的組織改建過程與正常牙周組織有無區(qū)別等這些與正畸臨床密切相關(guān)的問題，目前國內(nèi)外相關(guān)報道非常少。 本實驗以國際公認的beagle犬為實驗動物，通過建立牙周組織喪失的動物實驗?zāi)Ｐ?，首次探索了在?yīng)用EMD進行牙周重建術(shù)后，模擬正畸臨床加力

3、周期，觀察不同時間點牙周組織的變化。從組織形態(tài)學觀察到蛋白、基因表達水平，應(yīng)用免疫組織化學(1mmunohistochemistry IHC)，原位雜交(In situ hibridization ISH)技術(shù)等方法比較EMD重建的牙周組織中與骨改建密切相關(guān)的因子骨保護素(osteoprotegerin OPG)，破骨細胞分化因子(osteoclast differentiation factor ODF／RANKL)及核心結(jié)合因子(c

4、orebinding factor Cbfal)的分布變化規(guī)律與正常的牙周組織有無區(qū)別。從骨形成和骨吸收兩方面為牙周組織喪失的患者應(yīng)用EMD進行牙周重建后能否進行正畸牙移動提供初步的實驗依據(jù)，為重建牙周組織及后續(xù)成人正畸機理的系列深入研究奠定基礎(chǔ)并且提供一定的研究方向。 結(jié)果顯示： 1．通過外科手術(shù)方法成功建立了牙周組織喪失的實驗動物模型。應(yīng)用 EMDl2周后，根據(jù)x線片、組織形態(tài)學檢查，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用EMD組新生 牙槽骨

5、骨量大于對照組。 2．在正畸力作用下，EMD重建的牙周組織形態(tài)學變化與正常牙周相比未 見明顯的區(qū)別。 3．初次加力后的第一周，調(diào)控骨形成的關(guān)鍵性因子Cbfal蛋白在實驗組 的表達強于手術(shù)對照組和非手術(shù)對照組。此后不同時間點的表達變化 規(guī)律三個組問無明顯的區(qū)別。實驗組、手術(shù)對照組和非手術(shù)對照組均 在牙周膜成纖維細胞、成骨細胞、成牙骨質(zhì)細胞、間充質(zhì)細胞和破骨 細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)Cbfal蛋白的陽性表達。不同的時間點，其分布

6、呈現(xiàn)一定 的空間特異性。 4．初次加力后的第一周，破骨細胞的分化因子RANKL蛋白和mRNA在 實驗組的表達低于手術(shù)對照組和非手術(shù)對照組。此后三個組不同時間 點的表達變化規(guī)律無明顯的區(qū)別。三個組的牙周膜成纖維細胞、成骨 細胞、成牙骨質(zhì)細胞、骨細胞、間充質(zhì)細胞和破骨細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)RANKL_ 蛋白和mRNA的陽性信號。具有時間和空間分布的特異性。 5．初次加力后的第一周，破骨細胞抑制因子OPG蛋白和mRNA在實

7、驗 組部分骨小梁邊緣的骨細胞和成骨細胞有表達，而手術(shù)對照組和非手 術(shù)對照組未見明顯表達。此后三個組的分布變化規(guī)律類似。OPG蛋白和mRNA的陽性信號均可在三個組的牙周膜成纖維細胞，成骨細胞， 成牙骨質(zhì)細胞、骨細胞、間充質(zhì)細胞和破骨細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)。隨時間的變 化，存在一定的空間分布規(guī)律。 本研究結(jié)論： 1．應(yīng)用EMD重建的牙周組織新生的牙槽骨的骨量大于對照組。 2．從組織形態(tài)學和調(diào)控骨改建的關(guān)鍵性因子的變化規(guī)律

8、提示應(yīng)用EMD 重建的牙周組織可以進行正畸牙移動。 3．根據(jù)Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在初次加力后的第一周的表達情況，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用EMD重建的牙周組織具有一定的抵抗骨吸收的能力。而在其它的時間段，應(yīng)用EMD組的骨組織改建活動與非手術(shù)對照組和手術(shù)對照組未見明顯的差別。 4．實驗組Cbfal蛋白、RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白和mRNA在破骨細胞的陽性表達，充分證明了牙移動過程中，應(yīng)用

9、EMD重建牙周組織的破骨細胞也可以產(chǎn)生一定的RANKL和OPG,其骨吸收和骨形成活動同樣處于一種動態(tài)的平衡，是骨改建活動相互關(guān)聯(lián)、密不可分的兩個部分。 5．正畸力作用下，調(diào)控骨改建的關(guān)鍵因子Cbfal、RANKL和OPG在實 驗組表達變化規(guī)律與手術(shù)對照組和非手術(shù)對照組類似，證明Cbfal、RANKL和OPG在EMD重建牙周組織的成骨和破骨活動中同樣發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。 綜上所述，EMD作為一種有應(yīng)用前景的生物制劑，為臨