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1、目的:研究細(xì)胞間黏附分子5(ICAM-5)在缺氧缺糖神經(jīng)元模型中的表達(dá)變化 方法:①建立直接氧糖剝奪(OGD)神經(jīng)元模型并驗(yàn)證OGD模型的效果;②利用穩(wěn)定表達(dá)常量人ICAM-5蛋白的PAJU-ICAM-5細(xì)胞株和具有NEO抗性的PAJU-NEO細(xì)胞株作為神經(jīng)元OGD模型,分別對(duì)PAJU-ICAM-5和PAJU-NEO細(xì)胞進(jìn)行不同時(shí)間段的OGD處理,然后用Western Blot法檢測(cè)OGD處理后不同時(shí)間段內(nèi)ICAM-5蛋白表達(dá)量
2、的變化;用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;③在倒置相差光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞突起形態(tài)學(xué)變化并對(duì)突起長(zhǎng)度進(jìn)行顯微測(cè)量。 結(jié)果:⑴經(jīng)免疫熒光及Western Blot法雙重檢測(cè)缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1a的表達(dá)證明OGD神經(jīng)元模型成功建立。⑵細(xì)胞經(jīng)過OGD處理后,隨著時(shí)間延長(zhǎng),Western Blot顯示ICAM-5蛋白表達(dá)量逐漸降低。⑶經(jīng)過OGD處理后,PAJU-ICAM-5細(xì)胞凋亡率明顯較PAJU-NEO細(xì)胞低(P<0.05); PAJU-
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