亞低溫對延長再建血運(yùn)治療時間窗及其對腦保護(hù)的研究.pdf

1、目的：再建血運(yùn)（再灌注）如溶栓治療是被公認(rèn)和各國FDA批準(zhǔn)的的急性缺血性卒中的唯一治療手段，但3小時治療時間窗的限制使多數(shù)多病人不能獲益。亞低溫（28-35℃）是最早在臨床實踐中被證實有確切療效的的神經(jīng)保護(hù)手段，而且缺血性腦損傷實驗也證實亞低溫的神經(jīng)保護(hù)效果是最好的。為此，我們探討了再灌注期亞低溫能否延長再建血運(yùn)（再灌注）治療時間窗及其機(jī)制，并探討再灌注期亞低溫的腦保護(hù)機(jī)制。 方法：1將120只SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、大腦

2、中動脈完全閉塞24小時組（MCAO24h組）、常溫組：按再灌注時間點不同分為以下亞組：大腦中動脈閉塞2小時、3小時、4小時、5小時、6小時/灌注24小時組（MCAO2h再灌注組、MCAO3h再灌注組、MCAO4h再灌注組、MCAO5h再灌注組、MCAO6h再灌注組）；亞低溫組：按再灌注時間點不同分成與常溫組對應(yīng)的亞組。2實施亞低溫時將大鼠放入冰屋內(nèi)，調(diào)整冰屋內(nèi)冰袋數(shù)量，使大鼠肛溫維持在31±1℃，5h時后，將大鼠移至室內(nèi)環(huán)境復(fù)溫。亞低溫

3、在大腦中動脈再通后即刻實施并持續(xù)5小時。線拴法制備大鼠大腦中動脈缺血/再灌注模型。3采用免疫組化法檢測大鼠缺血/再灌注模型的AIF、Cyt C、HSP70和MMP-9、LN的表達(dá)，并進(jìn)行TTC染色觀察梗死體積，用干-濕重法測定腦含水量，對大鼠模型進(jìn)行Longa評分。 結(jié)果： 一再灌注期亞低溫與再建血運(yùn)（再灌注）治療時間窗的關(guān)系及其腦保護(hù)的研究結(jié)果 1、與腦梗死的近期結(jié)局MCAO24h組的梗死體積、Longa評分比

4、較：常溫組MCAO2-4h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-6h再灌注各組沒有顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注各組沒有顯著性差異（P>0．05） 2亞低溫各組的梗死體積、Longa評分和含水量均顯著低于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 二、再灌注期亞低溫延長再建血運(yùn)（再灌注）治療時

5、間窗及其腦保護(hù)機(jī)制的研究結(jié)果 1細(xì)胞凋亡角度研究的結(jié)果 1．1缺血/再灌注各組（常溫組、亞低溫組）的AIF、Cyt C、HSP70均顯著高于假手術(shù)組（P<0．01）。 1．2亞低溫各組的AIF、Cyt C均顯著低于相應(yīng)常溫組，而HSP70各組陽性細(xì)胞計數(shù)均顯著高于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 1．3與腦梗死近期結(jié)局MCAO24h組的AIF、Cyt C、HSP

6、70：常溫組MCAO2-4h再灌注組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）。 2．血管通透性角度研究的結(jié)果 2．1缺血/再灌注各組（常溫組、亞低溫組）的MMP-9的表達(dá)與層粘連蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0．817，P<0．01）。 2．2再灌注各組（常溫

7、組、亞低溫組）的MMP-9顯著高于假手術(shù)組（P<0．01）；層粘連蛋白顯著低于假手術(shù)組（P<0．01）。 2．3亞低溫各組的MMP-9均顯著低于相應(yīng)常溫組，而層粘連蛋白MCAO2-6h各組陽性細(xì)胞計數(shù)均顯著高于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 2．4與腦梗死近期結(jié)局MCAO24h的MMP-9、層粘連蛋比較：常溫組MCAO2-4h再灌注組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-

8、6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）。 結(jié)論： 1．再灌注期亞低溫可延長再建血運(yùn)（再灌注）治療的時間窗，通過發(fā)揮再灌注期亞低溫的腦保護(hù)作用（通過同時抑制非caspase和caspase兩種凋亡途徑，提高HSP70的表達(dá)，以全面抑制半暗帶細(xì)胞的凋亡；對MMP-9的有效抑制使腦微循環(huán)破壞減輕，微循環(huán)承受再灌注

9、能力上升。），實現(xiàn)延長治療時間窗的目的。 2．再灌注期亞低溫是一項理想的延長再建血運(yùn)（再灌注）治療時間窗的手段：它從抑制半暗帶細(xì)胞的凋亡和減輕腦血管損傷提高微循環(huán)承受再灌注能力等多個角度阻斷或減緩缺血/再灌注后的惡性病理生理進(jìn)程，全面保護(hù)缺血/再灌注的腦組織，延長時間窗的效果明顯。而其它延長時間窗的治療手段，作用機(jī)制單一，針對性較差（一般不直接針對缺血/再灌注的病理生理），效果較弱；特別是臨床實際上，病人就診時不可能提前給予亞低