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文檔簡介
1、目的:動態(tài)觀察亞低溫治療新生HIE大鼠腦神經元凋亡及神經元內BDNF表達情況,并通過水迷宮實驗評價大鼠記憶功能,探討亞低溫對HIE大鼠治療的神經保護作用及遠期療效。 方法:采用Rice法建立新生SD大鼠HIE模型,并于6小時內進行亞低溫(31℃)治療48小時,HIBD對照組為建模后37℃下觀察48小時。干預后24小時、7天及28天,采用TUNEL染色分別對比觀察不同組間大鼠海馬神經元凋亡情況,免疫組化后用光密度分析法分別對比觀察
2、不同組間大鼠海馬BDNF表達情況,并于干預后28天行水迷宮試驗,通過逃避潛伏期試驗和空間探索實驗了解各組大鼠的學習記憶功能。 結果: (1)HIE模型觀察:建立模型后24h,HIE組大鼠活動明顯少于假手術組,14d后該組有明顯的腦缺血側眼瞼下垂;對腦標本進行HE染色光鏡下觀察發(fā)現,腦水腫明顯,海馬神經元排列紊亂,可見片狀死亡細胞,而假手術組腦無明顯異常。 (2)TUNEL染色結果:亞低溫治療后24小時及7天,亞低
3、溫治療組海馬神經元凋亡數目分別為28.4±4.21和22.8±1.92,HIBD對照組分別為52.4±6.20和37.6±6.58,假手術組分別為2.01±2.30和1.62±4.51,亞低溫治療組海馬神經元凋亡明顯低于HIE對照組(p<0.05);干預后28天,上述各組間,海馬神經元凋亡無明顯差異(p>0.05)。 (3)免疫組化結果:以光密度方法分析BDNF在海馬的表達情況,亞低溫治療后24小時及7天,亞低溫治療組海馬神經元
4、內BDNF表達分別為11215.04±620.48和8736.08±495.04,HIBD對照組分別為3920.48±410.02和2952.32±245.01,假手術組分別為1312.77±176.00和1474.74±151.14,亞低溫組明顯高于對照組(p<0.05),而與假手術組相比較無明顯差異(p>0.05);干預后28天,上述各組間,神經元內BDNF表達均無明顯差異(p>0.05)。 (4)水迷宮實驗結果:亞低溫治療
5、后各組大鼠飼養(yǎng)(相同條件下)28天,逃避潛伏期實驗結果示:亞低溫治療組6.858±3.33秒,HIE對照組51.779±11.77秒,假手術組4.321±2.35秒,表明亞低溫治療組所需時間明顯短于對照組(p<0.05),與假手術組相比較無明顯差異(p>0.05);空間探索實驗結果示:亞低溫治療組59.33±10.81%,HIBD對照組9.03±5.36%,假手術組68.18±8.17%,表明亞低溫治療組在平臺區(qū)間航行百分比明顯高于對照
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