急慢性應激對小鼠空間學習記憶功能的影響及IGF-Ⅱ的作用.pdf

1、本研究采用足底電擊應激原建立急性應激動物模型;采用7種應激方式(禁水、束縛+熱刺激、禁食、高臺、冷水刺激、電擊足底、束縛,21天)建立慢性應激動物模型,研究急、慢性應激對不同月齡小鼠自發(fā)行為和空間學習記憶能力的影響及其作用機制。以曠場實驗檢測小鼠在新異環(huán)境中的自發(fā)活動和探究行為;采用Morris水迷宮試驗測定小鼠空間學習記憶能力;采用HE染色觀察小鼠海馬和前腦皮層神經元的形態(tài)變化;通過免疫組織化學方法檢測小鼠海馬和前腦皮層IGF-Ⅱ的表

2、達。
　　研究結果:
　　1.急性應激后即刻,與青年對照組小鼠相比,青年應激組小鼠的爬行格數(shù)和直立次數(shù)明顯增加,中央格停留時間和糞便粒數(shù)顯著減少;應激停止后一周,青年應激組小鼠各項行為指標與對照組小鼠相比,無顯著性差異。急性應激后即刻和應激停止后一周,老年應激組小鼠的曠場行為與青年應激組小鼠的變化趨勢是一致的。
　　急性應激后即刻,與青年對照組小鼠相比,老年對照組小鼠爬行格數(shù)和直立次數(shù)明顯減少。
　　2.在定位航

3、行實驗中,急性應激后即刻,青年組小鼠和老年組小鼠的逃避潛伏期分別與對照組小鼠相比均顯著縮短;與青年組小鼠比較,老年對照組小鼠和老年應激組小鼠的逃避潛伏期均明顯延長。應激停止后一周,對照組小鼠和應激組小鼠的逃避潛伏期無顯著性差異。
　　空間搜索試驗中,在急性應激后即刻,青年和老年應激組小鼠在第一象限(原平臺象限)的游泳時間分別與對照組小鼠相比均明顯延長。青年和老年對照組小鼠比較無顯著性差異。應激停止后一周,應激組與對照組無顯著性差異

4、。
　　3.急性應激后即刻與應激停止后一周,與對照組小鼠比較,青年應激組小鼠和老年應激組小鼠的神經元形態(tài)結構沒有顯著變化。
　　急性應激后即刻,應激組小鼠海馬和前腦皮層 IGF-Ⅱ陽性細胞數(shù)明顯增加,平均目標灰度值顯著降低,各腦區(qū) IGF-Ⅱ表達均顯著上升;青年應激組小鼠變化尤為明顯。應激停止后一周,應激組與對照組 IGF-Ⅱ的表達無顯著性差異。分別與青年對照組和應激組小鼠相比,老年對照組和應激組小鼠IGF-Ⅱ的表達顯著降低

5、。
　　4.慢性應激后即刻,與青年對照組小鼠相比,青年應激組小鼠的爬行格數(shù)、直立次數(shù)和修飾次數(shù)均顯著減少,中央格停留時間和糞便粒數(shù)顯著增加;應激停止后一周,青年應激組的爬行格數(shù)仍顯著減少,中央格停留時間和糞便粒數(shù)仍顯著增加。老年組小鼠在應激后即刻和應激停止后一周,與青年組小鼠的變化趨勢是一致的,且變化更明顯。
　　慢性應激后即刻,與青年對照組小鼠相比,老年對照組小鼠的直立次數(shù)和修飾次數(shù)明顯減少。
　　5.慢性應激后即刻

6、和應激停止后一周,在定位航行試驗中,青年應激組小鼠和老年應激組小鼠的逃避潛伏期與相應對照組相比,均顯著降低;與青年組小鼠相比,老年組小鼠的逃避潛伏期顯著延長。
　　在空間搜索試驗中,慢性應激后即刻,青年應激組小鼠和老年應激組小鼠在第一象限(原平臺象限)的游泳時間與相應對照組相比,均顯著縮短。青年對照組小鼠和老年對照組小鼠相比,無顯著性差異。
　　6.慢性應激組小鼠與對照組小鼠相比,海馬和前腦皮層神經元數(shù)目減少,排列松散、稀疏

7、,有細胞著色淺,染色不均勻,且有細胞發(fā)生萎縮。與青年對照組相比,老年對照組小鼠各腦區(qū)神經元分布略有稀疏,但細胞結構完整,排列整齊。與青年應激組小鼠比較,老年應激組小鼠的神經元損傷情況更為嚴重,在應激停止后一周后仍無顯著改變。
　　慢性應激組小鼠海馬和前腦皮層 IGF-Ⅱ陽性細胞數(shù)目顯著減少,平均目標灰度值明顯增加,各腦區(qū) IGF-Ⅱ的表達均顯著下調;老年應激組小鼠的變化更為明顯。與青年對照組小鼠和應激組小鼠相比,老年對照組和應激組

8、小鼠IGF-Ⅱ的表達明顯降低。
　　研究結論:
　　1.隨著年齡的增長,小鼠在新異環(huán)境中的自發(fā)行為和探究活動能力降低;空間學習記憶能力減退。
　　2.急性應激增強小鼠的曠場行為,顯著增強小鼠的空間學習記憶能力;而慢性應激減少小鼠的曠場行為,明顯損傷小鼠的空間學習記憶能力。
　　3.急性應激對神經元形態(tài)結構無明顯影響;慢性應激則會導致小鼠海馬和前腦皮層神經元形態(tài)發(fā)生變化,老年鼠的變化更為顯著。
　　4.急性應