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1、應(yīng)激是指?jìng)€(gè)體在受到外界強(qiáng)烈或有害的刺激時(shí)出現(xiàn)的綜合性應(yīng)答狀態(tài),包括精神、神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫等方面的反應(yīng)。應(yīng)激對(duì)健康具有雙重意義,適度的應(yīng)激有助于學(xué)習(xí)與記憶,但慢性、長(zhǎng)期應(yīng)激則會(huì)對(duì)機(jī)體造成不同程度的損傷,嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)抑郁癥、學(xué)習(xí)記憶障礙、應(yīng)激性精神紊亂、癡呆、免疫力低下等多系統(tǒng)疾患。下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)(Hypothalamus-pituitary-adrenal cortex,HPA)軸激活是應(yīng)激反應(yīng)的最重要特征。研究表明,慢性應(yīng)激或
2、皮質(zhì)醇增多可導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)中海馬、杏仁核、下丘腦和前額葉皮層等腦區(qū)的氧化應(yīng)激狀態(tài)增強(qiáng),細(xì)胞壞死、樹(shù)突萎縮等,并可導(dǎo)致紋狀體單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量下降。
天然的黃酮類化合物具有廣泛的生物學(xué)活性,大量研究表明黃酮類化合物可用于預(yù)防和治療慢性應(yīng)激引起的抑郁、焦慮以及學(xué)習(xí)與記憶能力減退等。其中,楊梅黃酮具有非常強(qiáng)的抗氧化、螯合金屬離子等作用,一些實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了楊梅黃酮對(duì)神經(jīng)退行性疾病的保護(hù)作用。但尚未有楊梅黃酮拮抗慢性應(yīng)激引起的抑郁、學(xué)
3、習(xí)與記憶能力減退等的相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用強(qiáng)迫游泳、懸尾實(shí)驗(yàn)以及水迷宮等一系列的行為學(xué)測(cè)試方法,觀察了經(jīng)反復(fù)禁錮后,小鼠抑郁樣行為、空間學(xué)習(xí)與記憶能力的改變,并應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)觀察了小鼠血漿中促腎上腺皮質(zhì)激素(Adrenocorticaltrophic hormone,ACTH)和皮質(zhì)酮的含量以及小鼠海馬中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽還原酶(Glutathione pero
4、xidase,GSH-PX)的活性,同時(shí)觀察了楊梅黃酮對(duì)這些改變的影響,為楊梅黃酮對(duì)慢性應(yīng)激引起的抑郁及學(xué)習(xí)與記憶功能減退的治療和預(yù)防提供有價(jià)值的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
1.與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P<0.001),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,完全逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間的增加(P<0.001)。與對(duì)照組相比,單獨(dú)應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠的不動(dòng)時(shí)間
5、沒(méi)有影響(P>0.05)。
2.懸尾實(shí)驗(yàn)中,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠的不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng),與對(duì)照組相比具有顯著性差異(P<0.001),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,完全逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠在懸尾實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間的增加(P<0.01)。與對(duì)照組相比,單獨(dú)應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠的不動(dòng)時(shí)間沒(méi)有影響(P>0.05)。
3.曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠在中心區(qū)域(50%)和外周區(qū)域(50%)的時(shí)間均沒(méi)有改
6、變(P>0.05)。應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠在曠場(chǎng)中心區(qū)域和外周區(qū)域的時(shí)間也沒(méi)有影響(P>0.05)。
4.水迷宮實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠訓(xùn)練期間的逃避潛伏期無(wú)差異(P>0.05)。應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠在訓(xùn)練期間的逃避潛伏期無(wú)影響(P>0.05)。
5.水迷宮實(shí)驗(yàn)中,第5天測(cè)試時(shí),反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠在目標(biāo)象限與毗連象限的時(shí)間無(wú)差異(P>0.05),而對(duì)照小鼠和楊梅黃酮處理小鼠在目標(biāo)象限的時(shí)間顯著長(zhǎng)
7、于毗連象限(P<0.001)和對(duì)側(cè)象限(P<0.001)。
6.水迷宮實(shí)驗(yàn)中,第7天測(cè)試時(shí),各組小鼠在目標(biāo)象限的時(shí)間顯著長(zhǎng)于毗連象限和對(duì)側(cè)象限(P<0.001)。與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠在目標(biāo)象限的時(shí)間顯著減少(P<0.05),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,完全逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠在目標(biāo)象限時(shí)間的減少(P<0.001)。
7.與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠血漿ACTH水平顯著升高(P<0.
8、001),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,完全逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠ACTH的升高(P<0.001)。與對(duì)照組相比,單獨(dú)應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠的血漿ACTH水平無(wú)影響(P>0.05)。
8.與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠血漿皮質(zhì)酮水平顯著升高(P<0.001),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,完全逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠皮質(zhì)酮的增加(P<0.001)。與對(duì)照組相比,單獨(dú)應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠的血漿皮質(zhì)酮水平無(wú)影響(P>0.0
9、5)。
9.與對(duì)照組相比,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠海馬谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)活性顯著降低(P<0.01),楊梅黃酮(50mg/kg)連續(xù)21天給藥,部分逆轉(zhuǎn)了應(yīng)激小鼠GSH-PX活性的降低(P<0.05)。與對(duì)照組相比,單獨(dú)應(yīng)用楊梅黃酮對(duì)小鼠的海馬GSH-PX水平無(wú)影響(P>0.05)。
上述結(jié)果提示,反復(fù)禁錮慢性應(yīng)激模型小鼠可引起抑郁樣癥狀,并造成空間學(xué)習(xí)與記憶能力減退,而給予楊梅黃酮處理,可顯著改善應(yīng)
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