社會(huì)失敗應(yīng)激致小鼠抑郁行為及空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)影響初探.pdf

1、目的:
　　通過(guò)社會(huì)失敗應(yīng)激(social defeat stress)建立抑郁動(dòng)物模型,對(duì)應(yīng)激小鼠進(jìn)行抑郁行為的評(píng)估,并通過(guò)社會(huì)逃避實(shí)驗(yàn)篩選出社會(huì)失敗應(yīng)激易感小鼠。一方面,探討社會(huì)失敗應(yīng)激小鼠空間學(xué)習(xí)記憶情況,另一方面,探討學(xué)習(xí)記憶任務(wù)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)產(chǎn)生的影響,并初步探討學(xué)習(xí)記憶任務(wù)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)產(chǎn)生影響的機(jī)制,包括相關(guān)的信號(hào)通路分子ERK、P-ERK的表達(dá)情況,以及突觸標(biāo)記物PSD-95在海馬的表達(dá)情況。
　　方法:
　　

2、1.抑郁動(dòng)物模型的建立:連續(xù)給予C57BL/6小鼠社會(huì)失敗心理應(yīng)激21天,應(yīng)激結(jié)束24小時(shí)后依次通過(guò)社會(huì)交互實(shí)驗(yàn)、開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水偏愛實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)手段對(duì)小鼠進(jìn)行抑郁行為評(píng)價(jià),并篩選出對(duì)社會(huì)失敗應(yīng)激易感的小鼠。
　　2.社會(huì)失敗應(yīng)激小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的評(píng)估:采用Morris水迷宮對(duì)應(yīng)激小鼠進(jìn)行共12天的學(xué)習(xí)記憶能力評(píng)估,包括獲得性訓(xùn)練、探查訓(xùn)練、對(duì)位訓(xùn)練和對(duì)位探查訓(xùn)練。
　　3.空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)的影響評(píng)估:Morris

3、水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束48小時(shí)后,采用社會(huì)交互實(shí)驗(yàn)、開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水偏愛實(shí)驗(yàn)評(píng)估空間學(xué)習(xí)記憶對(duì)應(yīng)激所致抑郁行為的影響。
　　4.等量游泳對(duì)應(yīng)激效應(yīng)的影響評(píng)估:為了排除Morris水迷宮中游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)的影響,對(duì)應(yīng)激小鼠采用等時(shí)間長(zhǎng)度的游泳,水迷宮實(shí)驗(yàn)設(shè)備中不放置平臺(tái),12天等量游泳結(jié)束48小時(shí)后,采用社會(huì)交互實(shí)驗(yàn)、開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水偏愛實(shí)驗(yàn)評(píng)估等量游泳訓(xùn)練對(duì)應(yīng)激所致抑郁行為的影響。
　　5.行為學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)束后,采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)突

4、觸標(biāo)記物PSD-95的變化,Western blotting檢測(cè)海馬ERK、P-ERK的變化。
　　結(jié)果:
　　1.社會(huì)失敗應(yīng)激易感小鼠的篩選及行為學(xué)評(píng)估
　　與對(duì)照組相比,社會(huì)失敗應(yīng)激導(dǎo)致40-60％的小鼠出現(xiàn)顯著社會(huì)逃避的抑郁樣行為,為應(yīng)激易感小鼠。在開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中,社會(huì)失敗應(yīng)激易感和非易感小鼠與對(duì)照組相比探究行為均顯著下降。在糖水偏愛實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)激易感組小鼠與對(duì)照組相比出現(xiàn)顯著糖水偏愛降低的抑郁樣行為,而應(yīng)激非易感小鼠

5、則與對(duì)照組一樣表現(xiàn)出明顯的糖水偏愛。
　　2.社會(huì)失敗應(yīng)激對(duì)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響
　　在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)獲得性訓(xùn)練、探查訓(xùn)練、對(duì)位訓(xùn)練、對(duì)位探查訓(xùn)練中,社會(huì)失敗應(yīng)激易感組、非易感組和對(duì)照組相比,隨著訓(xùn)練天數(shù)增加,小鼠找到平臺(tái)的時(shí)間逐漸縮短,且各組間沒(méi)有差異,表明社會(huì)失敗應(yīng)激不損害小鼠空間學(xué)習(xí)記憶。
　　3.空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)對(duì)應(yīng)激效應(yīng)的影響
　?、費(fèi)orris水迷宮空間學(xué)習(xí)任務(wù)訓(xùn)練顯著阻斷了應(yīng)激易感小鼠在社

6、會(huì)交互實(shí)驗(yàn)中的社會(huì)逃避的抑郁行為,對(duì)照組和非易感組小鼠社會(huì)交互行為無(wú)變化。②Morris水迷宮空間學(xué)習(xí)任務(wù)訓(xùn)練顯著阻斷了應(yīng)激易感小鼠在開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的探究行為的減少,對(duì)照組和非易感組小鼠探究行為無(wú)變化。③Morris水迷宮空間學(xué)習(xí)任務(wù)訓(xùn)練顯著阻斷應(yīng)激易感小鼠在糖水偏愛下降的抑郁行為,對(duì)照組和非易感組小鼠糖水偏愛行為無(wú)變化。
　　4.等量游泳訓(xùn)練對(duì)應(yīng)激小鼠效應(yīng)的影響
　?、俚攘坑斡居?xùn)練未改善應(yīng)激易感小鼠在社會(huì)交互實(shí)驗(yàn)中的社會(huì)逃避的

7、抑郁行為,對(duì)照組和非易感組小鼠社會(huì)交互行為無(wú)變化。②等量游泳訓(xùn)練不改變應(yīng)激易感小鼠在開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的探究行為的減少,對(duì)照組和非易感組小鼠探究行為無(wú)變化。③等量游泳訓(xùn)練未改善應(yīng)激易感小鼠在糖水偏愛下降的抑郁行為,對(duì)照組和非易感組小鼠糖水偏愛行為無(wú)變化。
　　5.社會(huì)失敗應(yīng)激及水迷宮空間學(xué)習(xí)任務(wù)改善應(yīng)激效應(yīng)影響后海馬 CA3區(qū)突觸標(biāo)記物PSD-95的表達(dá)變化
　?、僭谏鐣?huì)失敗應(yīng)激后,易感組與對(duì)照組相比,海馬CA3區(qū)PSD-95表達(dá)顯

8、著降低,非易感組與對(duì)照組相比沒(méi)有變化。②12天水迷宮訓(xùn)練后,易感+水迷宮組與對(duì)照+水迷宮組相比海馬CA3區(qū)PSD-95表達(dá)沒(méi)有差異,而易感+水迷宮組與易感組相比,海馬CA3區(qū)PSD-95表達(dá)顯著增加,非易感+水迷宮組與對(duì)照組、非易感組相比均沒(méi)有差異。
　　6.社會(huì)失敗應(yīng)激及水迷宮空間學(xué)習(xí)任務(wù)改善應(yīng)激效應(yīng)影響后海馬ERK及P-ERK的表達(dá)變化
　　社會(huì)失敗應(yīng)激易感組小鼠海馬ERK1/2表達(dá)與非易感組、對(duì)照組相比沒(méi)有差異。而通過(guò)

9、12天的Morris水迷宮學(xué)習(xí)訓(xùn)練也未影響ERK1/2的表達(dá)。另外,社會(huì)失敗應(yīng)激易感組P-ERK1/2表達(dá)水平與對(duì)照組、非易感組相比顯著下降,而水迷宮空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)訓(xùn)練可顯著增加各組小鼠海馬P-ERK1/2的水平,阻斷了應(yīng)激所致的P-ERK1/2蛋白表達(dá)水平的下調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1.社會(huì)失敗應(yīng)激可導(dǎo)致小鼠群體中40-60%小鼠出現(xiàn)社會(huì)逃避、探究行為下降和糖水偏愛下降的抑郁樣行為,表現(xiàn)為應(yīng)激易感。
　　2.社會(huì)失敗

10、應(yīng)激易感小鼠及非易感小鼠均未出現(xiàn)空間學(xué)習(xí)記憶的改變,表明社會(huì)失敗應(yīng)激不損害空間學(xué)習(xí)記憶。
　　3.12天空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)可改善應(yīng)激易感小鼠抑郁樣行為,產(chǎn)生顯著抗抑郁作用,同時(shí)回復(fù)了社會(huì)失敗應(yīng)激易感小鼠海馬CA3區(qū)PSD-95的表達(dá)下調(diào),提示社會(huì)失敗應(yīng)激可能通過(guò)損害神經(jīng)可塑性而導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)抑郁樣行為,而空間學(xué)習(xí)任務(wù)可通過(guò)增強(qiáng)或者改善神經(jīng)可塑性從而對(duì)小鼠抑郁行為產(chǎn)生糾正作用。另外,海馬 P-ERK的表達(dá)水平在空間學(xué)習(xí)記憶任務(wù)后出現(xiàn)顯著