手術(shù)應(yīng)激與心理應(yīng)激對(duì)老年小鼠學(xué)習(xí)記憶功能影響的研究.pdf

1、術(shù)后認(rèn)知功能障礙(POCD，Postoperative cognitive dysfunction)是在臨床工作中常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，尤其好發(fā)于老年患者麻醉手術(shù)之后。在圍手術(shù)期，患者不僅接受了外科手術(shù)所帶來(lái)的軀體創(chuàng)傷，而且承受著一定程度的心理負(fù)擔(dān)。實(shí)驗(yàn)室研究表明，單純外科手術(shù)可導(dǎo)致動(dòng)物的認(rèn)知功能損傷。然而，老年患者圍術(shù)期心理應(yīng)激是否會(huì)對(duì)其術(shù)后的學(xué)習(xí)記憶功能產(chǎn)生影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬評(píng)估手術(shù)應(yīng)激及心理應(yīng)激對(duì)老年C57小鼠學(xué)習(xí)及記憶功能的影

2、響，并進(jìn)一步探討影響產(chǎn)生的可能機(jī)制。
　　第一部分 手術(shù)應(yīng)激與心理應(yīng)激對(duì)老年小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響
　　目的:探討手術(shù)應(yīng)激、心理應(yīng)激以及心理應(yīng)激聯(lián)合手術(shù)應(yīng)激對(duì)老年C57小鼠學(xué)習(xí)及記憶功能的影響。
　　方法:老年雌性C57BL/6小鼠（14月齡，96只），按體重依次排序，隨機(jī)分為三個(gè)大組:手術(shù)應(yīng)激組(n=32)、心理應(yīng)激組(n=32)、聯(lián)合應(yīng)激組(n=32);每個(gè)大組下設(shè)兩個(gè)亞組分別為:干預(yù)組(n=16)和對(duì)照組(n=1

3、6)。手術(shù)應(yīng)激干預(yù)組小鼠接受局麻開(kāi)腹探查術(shù)，其對(duì)照組僅接受局麻，不開(kāi)腹。心理應(yīng)激干預(yù)組小鼠旁觀其他小鼠被電擊15天，每天2次，其對(duì)照組小鼠觀察的小鼠未被電擊。聯(lián)合應(yīng)激干預(yù)組在旁觀其他小鼠電擊15天后接受局麻開(kāi)腹手術(shù)，其對(duì)照組聯(lián)合上述兩種對(duì)照方式。在造模結(jié)束后1-7天，進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)老年小鼠的學(xué)習(xí)及記憶功能。
　　結(jié)果:1.手術(shù)應(yīng)激組和聯(lián)合應(yīng)激組中的干預(yù)組相比其各自對(duì)照組的水迷宮逃避潛伏期明

4、顯延長(zhǎng)，新物體辨別能力下降;2.心理應(yīng)激組內(nèi)干預(yù)組與對(duì)照組的水迷宮逃避潛伏期及新物體辨別能力無(wú)明顯差異;3.手術(shù)應(yīng)激組中干預(yù)組與聯(lián)合應(yīng)激組中干預(yù)組的水迷宮逃避潛伏期及新物體辨別能力無(wú)明顯差別。
　　結(jié)論:本研究未發(fā)現(xiàn)旁觀電擊實(shí)驗(yàn)所致的心理應(yīng)激會(huì)對(duì)老年小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力產(chǎn)生影響，心理應(yīng)激聯(lián)合手術(shù)應(yīng)激所致的認(rèn)知功能損傷程度與單純手術(shù)應(yīng)激所致的認(rèn)知功能損傷程度無(wú)明顯差別。
　　第二部分 手術(shù)應(yīng)激與心理應(yīng)激影響老年小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的

5、相關(guān)機(jī)制
　　目的:探討手術(shù)應(yīng)激、心理應(yīng)激及心理應(yīng)激聯(lián)合手術(shù)應(yīng)激對(duì)老年C57小鼠學(xué)習(xí)及記憶功能產(chǎn)生影響的可能機(jī)制。
　　方法:老年雌性C57BL/6小鼠（14月齡，108只），按體重依次排序，隨機(jī)分為三個(gè)大組:手術(shù)應(yīng)激組(n=36)、心理應(yīng)激組(n=36)、聯(lián)合應(yīng)激組(n=36);每個(gè)大組下設(shè)兩個(gè)亞組分別為:干預(yù)組(n=18)和對(duì)照組(n=18)。手術(shù)應(yīng)激干預(yù)組小鼠接受局麻開(kāi)腹探查術(shù)，其對(duì)照組僅接受局麻，不開(kāi)腹。心理應(yīng)激干預(yù)

6、組小鼠旁觀其他小鼠被電擊15天，每天2次，其對(duì)照組小鼠觀察的小鼠未被電擊。聯(lián)合應(yīng)激干預(yù)組在旁觀其他小鼠電擊15天后接受局麻開(kāi)腹手術(shù)，其對(duì)照組聯(lián)合上述兩種對(duì)照方式。在造模結(jié)束后的第1、3、7天，取血、取腦檢測(cè)各組C57小鼠血清、皮層及海馬內(nèi)TNF-α、p-AKT、p-mTOR及p-PKCα蛋白含量及海馬CA1區(qū)尼氏小體數(shù)量。
　　結(jié)果:1.尼氏染色發(fā)現(xiàn)在造模后第7天手術(shù)應(yīng)激干預(yù)組和聯(lián)合應(yīng)激干預(yù)組小鼠海馬CA1區(qū)尼氏體數(shù)目顯著低于其余

7、各實(shí)驗(yàn)亞組;2.ELISA結(jié)果顯示造模后第1天手術(shù)應(yīng)激組干預(yù)組和聯(lián)合應(yīng)激組干預(yù)組相比其各自對(duì)照組小鼠，血清內(nèi)TNF-α水平顯著升高;3.造模后第1-3天手術(shù)應(yīng)激組干預(yù)組和聯(lián)合應(yīng)激組干預(yù)組相比其各自對(duì)照組小鼠，海馬內(nèi)p-AKT表達(dá)被顯著抑制，皮層p-AKT無(wú)明顯改變;4.造模后第3天，手術(shù)應(yīng)激組干預(yù)組和聯(lián)合應(yīng)激組干預(yù)組相比其各自對(duì)照組小鼠，海馬和皮層內(nèi)p-mTOR表達(dá)量降低。5.所有干預(yù)組小鼠的皮層與海馬內(nèi)p-PKCα蛋白含量在術(shù)后第1天