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文檔簡介
1、本研究分為二部分:
第一部分、鈉鈣交換體NCX1在遺傳性高鈣尿結(jié)石大鼠腎組織中的表達(dá)及其在IH發(fā)病中的意義
目的:檢測鈉鈣交換體NCX1在遺傳性高鈣尿結(jié)石(GHS)大鼠腎組織的表達(dá)水平,探討其在IH發(fā)病中的意義。
方法:通過選擇近親的、尿鈣最高的雌雄大鼠配對,反復(fù)傳代培育遺傳性高鈣尿結(jié)石(GHS) 大鼠。本研究選取6只清潔級3月齡的第14代雄性GHS大鼠,對照組為6只月齡和體重相仿的健康清潔級正
2、常(Normal control,NC)雄性SD大鼠。兩組大鼠處死后立即取新鮮腎組織,分別應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western boltting法檢測NCX1在GHS大鼠和NC大鼠腎組織中的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn),采用spss15.0軟件包,P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:在基因表達(dá)水平上,實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示GHS組NCX1mRNA水平是NC組的1.09倍,兩組比較
3、差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在蛋白質(zhì)水平上,Western boltting結(jié)果顯示GHS大鼠和NC組大鼠NCX1蛋白的平均相對吸光度值A(chǔ)分別為(0.36±0.09)和(0.35±0.05),兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:NCX1是生理狀態(tài)下尿鈣主動重吸收重要蛋白分子,但其不是導(dǎo)致特發(fā)性高鈣尿癥的關(guān)鍵蛋白分子。
第二部分、細(xì)胞膜鈣泵 PMCA1b在遺傳性高鈣尿結(jié)石大鼠腎組織中的表達(dá)及
4、其在IH發(fā)病中的作用
目的:研究細(xì)胞膜鈣泵 PMCA1b在遺傳性高鈣尿結(jié)石(GHS)大鼠腎臟中的表達(dá),并探討其在IH發(fā)病中的作用。
方法:本研究選取6只清潔級3月齡的第14代雄性GHS大鼠,對照組為6只月齡和體重相仿的健康清潔級正常(NC)雄性SD大鼠。兩組大鼠處死后立即取新鮮腎組織,分別應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western boltting法檢測兩組大鼠腎臟中PMCA1b在基因與蛋白水平上的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)
5、數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn),采用spss15.0軟件包,P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:在基因水平上,實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示GHS組PMCA1bmRNA水平是NC組的1.38倍,但兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在蛋白質(zhì)水平上,Western boltting結(jié)果顯示GHS大鼠PMCA1b表達(dá)明顯低于NC組大鼠,平均相對吸光度值A(chǔ)分別為(0.18±0.05)和(0.43±0.07
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