高遷移率族蛋白B1在香煙誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺部的表達.pdf

1、研究背景:慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)是以不完全可逆的氣流受限為特征的呼吸系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病,且發(fā)病率在逐年增加。其病因及發(fā)病機制尚不完全清楚,氣道、肺實質(zhì)及肺血管的慢性炎癥是其特征性改變,危險因素包括吸煙、粉塵、刺激性氣體、感染、免疫、年齡、氣候等,其中吸煙是引起COPD發(fā)生、發(fā)展的最主要的危險因素。煙熏法復(fù)制COPD動物模型的研究已有成功應(yīng)用。高遷移率族蛋

2、白B1(High Mobility Group Box-1 protein,HMGB1)是一種普遍存在于真核細胞的高度保守的核蛋白。胞內(nèi)HMGB1參與DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、修復(fù)等。胞外HMGB1是一種重要的晚期炎癥因子,在多種急慢性炎性疾病中具有重要意義,如急性肺損傷、肺癌、肺纖維化等。但HMGB1在大鼠慢阻肺模型中的作用尚未見報道。因此本研究通過煙熏法制作COPD大鼠模型,檢測HMGB1在COPD模型大鼠及戒煙后大鼠肺中的表達并對比其動

3、態(tài)變化,初步探討HMGB1在COPD發(fā)病中的作用。
　　目的:通過煙熏法建立大鼠COPD模型并予以戒煙,檢測大鼠模型及戒煙后大鼠肺組織中HMGB1的表達情況,比較HMGB1在對照組、模型組和戒煙組三組之間的差別,初步探討HMGB1在香煙誘導(dǎo)的COPD大鼠模型中的作用。
　　方法:通過被動吸煙的方法制作大鼠模型。將30只大鼠隨機分為正常對照組、COPD組和COPD戒煙組,每組10只。正常對照組自由攝食飲水,不作任何處理;COP

4、D組和COPD戒煙組在自制熏煙箱中給予被動吸煙,同時點燃5支香煙,放入箱內(nèi)自然燃燒至燃燒完全,煙霧基本消失,約30min,打開箱蓋,休息5min后重復(fù)上述操作。間隔4h后重復(fù)上述兩次過程,每天被動吸煙總計2h。每周6d,休息1d,持續(xù)20周后造模結(jié)束,正常對照組和COPD組大鼠處死取材,COPD戒煙組正常飼養(yǎng)10周后處死取材。光鏡下觀察支氣管肺組織病理形態(tài)學改變并定量分析,免疫組化法檢測HMGB1在各組大鼠肺組織中的表達。
　　結(jié)

5、果:模型組大鼠肺泡腔不規(guī)則擴大,呈現(xiàn)明顯的肺氣腫樣改變,戒煙后肺組織病理形態(tài)無明顯改善。正常對照組、COPD組和戒煙組肺平均內(nèi)襯間隔分別為38.7±8.6、62.7±9.9、55.6±9.1(10-6m/個),正常對照組與COPD組、戒煙組之間比較差異均有統(tǒng)計學意義,COPD組和戒煙組間差異無統(tǒng)計學意義。大鼠肺組織進行免疫組化染色法檢測HMGB1的表達,可見HMGB1主要分布于支氣管及肺泡上皮細胞,與對照組比較,模型組大鼠肺組織HMGB

6、1的表達強度明顯增強,戒煙組表達強度介于正常對照組和COPD模型組之間,用圖形分析軟件對染色結(jié)果進行分析,測量并記錄每個視野HMGB1的陽性染色的平均積分光密度值(IOD),正常對照組(24.4±5.2),COPD組(55.2±20.1),戒煙組(37.7±6.4),三組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論:1.單純熏煙法可成功制作COPD模型,戒煙后已形成的COPD肺部病理形態(tài)無明顯改善。
　　2.HMGB1主要分布于