阿爾茨海默病小鼠模型中Bcl-2與VEGF的表達及其意義.pdf

1、[目的]
　　 通過對清潔級昆明種小鼠腹腔聯(lián)合注射D-半乳糖和AlC13及D-半乳糖和NaNO2復(fù)制兩種類阿爾茨海默病動物模型，觀察阿爾茨海默病小鼠模型中腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化；探討B(tài)cl-2、VEGF在阿爾茨海默病動物模型中的變化情況，并進一步分析阿爾茨海默病時其表達的相關(guān)性；為進一步聯(lián)合治療奠定理論基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 80只清潔級昆明小鼠雌雄各半，體重18～22g，小鼠標準適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，按

2、照隨機對照表隨機分成4組，A：對照組1；B：對照組2；C：D-半乳糖+AlCl3組；D：D-半乳糖+NaNO2組；C組給予腹腔注射D-半乳糖90mg/(kg·d)(生理鹽水配制)以及AlCl340mg/(kg·d)(雙蒸水配制)90天；A組給予相同劑量的生理鹽水和雙蒸水腹腔注射；D組給予腹腔注射10g/L D-半乳糖120 mg/(kg·d)(生理鹽水配制)以及NaNO290mg/(kg·d)(雙蒸水配制)60天；B組給予相同劑量的生理

3、鹽水和雙蒸水腹腔注射；到期后處死小鼠并收集海馬組織，海馬組織病理標本行蘇木素-伊紅(HE)染色及尼氏染色觀察小鼠腦組織雙側(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元細胞病理形態(tài)學(xué)改變。免疫組織化學(xué)法(IH)檢測各組小鼠腦組織雙側(cè)海馬區(qū)Bcl-2和VEGF的表達。
　　 [結(jié)果]
　　 1.小鼠一般狀況改變：給藥8周后，C組小鼠出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍，體重增加緩慢；D組小鼠明顯反應(yīng)遲鈍，體重不增或降低，部分毛發(fā)缺失，稍微弓背，精神稍微萎靡，毛色黃且干澀，攝食減少

4、。給藥12周后，C組小鼠出現(xiàn)類似D組小鼠8周時的行為學(xué)改變。
　　 2.腦組織海馬區(qū)病理改變2.1.蘇木素-伊紅(HE)染色：對照組雙側(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則，呈圓形或橢圓形，排列緊密，胞核居中，核仁清晰，胞質(zhì)豐富。C組雙側(cè)海馬區(qū)多數(shù)神經(jīng)元細胞皺縮、形態(tài)不規(guī)則，數(shù)目減少，排列疏松，核染色質(zhì)邊集，并在少數(shù)神經(jīng)元細胞周邊出現(xiàn)較多核碎片。D組雙側(cè)海馬區(qū)多數(shù)神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則，核仁尚清晰，核染色質(zhì)邊集，胞質(zhì)略有減少，并發(fā)現(xiàn)少數(shù)神經(jīng)元細胞萎縮或

5、空囊泡狀改變。
　　 2.2.尼氏染色(Nissl's staining)：對照組雙側(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則，呈圓形或橢圓形，排列緊密，核仁清晰，神經(jīng)元細胞樹突、軸突及尼氏小體都清晰可見，胞質(zhì)豐富，微細結(jié)構(gòu)清晰可見。C組雙側(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)極不規(guī)則，排列明顯稀疏，數(shù)目顯著減少，大小各異，胞核、尼氏小體、樹突、軸突難以識別。D組雙側(cè)海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)不規(guī)則，數(shù)目減少，大小不一，排列疏松，胞核、尼氏小體、樹突、軸突模糊不清。
　　

6、 3.各組腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)目的變化情況 C組和D組腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)目與正常對照組相比顯著減少(P<0.05)，各組自身左側(cè)與右側(cè)腦組織海馬區(qū)相比神經(jīng)元數(shù)目減少無顯著性差異(P>0.05)。
　　 4.免疫組化(Immunohistochemical)檢測各組腦組織雙側(cè)海馬區(qū)Bcl-2和VEGF的表達與對照組相比，C組和D組腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元Bcl-2及VEGF陽性細胞數(shù)顯著減少(P<0.05)，各組自身左側(cè)與右側(cè)腦組織

7、海馬區(qū)相比神經(jīng)元Bcl-2及VEGF陽性細胞數(shù)無顯著差異(P>0.05)。
　　 5.各組雙側(cè)腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)相關(guān)性各組腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)無明顯相關(guān)性；各組自身左側(cè)與右側(cè)腦組織海馬區(qū)Bcl-2/VEGF陽性細胞數(shù)無相關(guān)性(P>0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 阿爾茨海默病動物模型中雙側(cè)腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元有顯著形態(tài)學(xué)變化；雙側(cè)海馬區(qū)Bcl-2、VEGF陽性細胞數(shù)顯