決明子多糖的結構及其對仔豬生長、免疫和腸道微生態(tài)的影響研究.pdf

1、本文應用氣相、氣質(zhì)聯(lián)用、核磁共振等檢測方法得出決明子水溶性多糖的結構：它的主鏈是以甘露糖1-4連接而成、在每第六個甘露糖的第六號碳原子的羥基被—分子半乳糖取代而形成半乳甘露聚糖。在結構研究的基礎上，研究了決明子多糖的生物學作用機理。通過以22日齡左右三元雜交(杜×長×大)仔豬為動物模型，研究了決明子多糖對實驗動物的生長性能、血清生化指標、免疫球蛋白濃度、血清白介素濃度、腸黏膜和腸淋巴結中IL-1β的基因表達水平及腸道微生態(tài)的體內(nèi)外影響，

2、旨在探討決明子多糖的結構與功能間的關系、探討決明子多糖對實驗動物的生長與免疫功能以及腸道微生態(tài)的作用機理。本論文動物實驗分為三個實驗進行。 實驗一研究了決明子多糖對仔豬生長性能及血清生化水平的影響。實驗選用22日斷奶仔豬36頭，隨機分為三組，分別為基礎日糧對照組、決明子多糖低劑量組、決明子多糖高劑量組，進行了為期兩周的飼養(yǎng)實驗。結果顯示：高劑量決明子多糖能顯著提高仔豬平均日增重、降低料肉比、提高肝臟中類胰島素生長因子IGF-1的

3、基因表達(p＜0.05)，而低劑量組與對照組間以上指標均沒有顯著差異；高劑量組較基礎組能顯著降低血漿尿素氮水平(p＜0.05)、極顯著提高血漿淀粉酶活性(p＜0.01)，而各組仔豬血糖、氨基酸間沒有顯著差異(p＞0.05)。這些指標綜合暗示高劑量決明子多糖能增加肝臟中IGF-1生長因子的基因表達，加速淀粉消化吸收、增加仔豬蛋白質(zhì)合成，從而促進仔豬生長性能的提高。 實驗二研究了決明子多糖對仔豬血清免疫球蛋白濃度、白介素IL-1β、

4、IL-2、IL-6濃度及腸黏膜、腸淋巴結中IL-1β的基因表達，以探討決明子多糖對仔豬免疫系統(tǒng)的影響。采用實驗一的分組設計進行，結果顯示高劑量組決明子多糖極顯著提高仔豬血清IgA、IgM的濃度(p＜0.01)；顯著提高血清IgG的濃度(p＜0.05)；低劑量組與對照組間IgA、IgG、IgM差異不顯著(p＞0.05)；高劑量組與基礎組間血清IL-1β、IL-2差異顯著(p＜0.05)、高劑量組與基礎組間IL-6差異不顯著(p＞0.05)

5、；低劑量組與基礎組間只有IL-6差異顯著(p＜0.05)，IL-1β、IL-6差異不顯著(p＞0.05)；低劑量與高劑量組間血清IL-1β、IL-2、IL-6濃度均無顯著性差異(p＞0.05)，表明一定濃度的決明子多糖可以提高動物的免疫能力。 實驗三研究決明子多糖對動物腸道微生態(tài)分布變化的體內(nèi)外影響。研究了體外決明子多糖對大腸桿菌和乳酸桿菌生長的影響和決明子多糖對動物腸道微生態(tài)分布變化的影響。結果表明：體外純培養(yǎng)中，與空白對照相

6、比，決明子多糖濃度大于0.05％的各度濃能提高乳酸桿菌數(shù)量，小于0.05％的濃度與空白間沒有差異；與空白對照相比決明子多糖溶液各濃度對大腸桿菌的生長沒有顯著影響；在混合培養(yǎng)中，與空白對照相比決明子多糖濃度大于0.05％各濃度均顯著提高乳酸桿菌數(shù)量和降低大腸桿菌數(shù)量。體內(nèi)實驗結果表明：低劑量組和高劑量決明子多糖組均能提高不同腸段中乳酸菌數(shù)量、降低大腸桿菌數(shù)量。高劑量組與對照組相比，盲腸黏膜微生物態(tài)和盲腸內(nèi)容物中微生物態(tài)的PCR-DGGE的

7、泳帶數(shù)量存在顯著差異(p＜0.05)；低劑量組與基礎組間差異雖然不顯著(p＞0.05)，但有增加泳帶數(shù)量的趨勢。體內(nèi)外實驗綜合表明一定濃度的決明子多糖顯著提高腸道內(nèi)有益菌群數(shù)量、降低有害菌群數(shù)量，可顯著改變動物腸道內(nèi)微生物區(qū)系。基于以上結果可以推論：由于決明子多糖不能被動物體消化但能被腸道厭氧發(fā)酵的乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌利用，且還具有改善腸道內(nèi)環(huán)境的作用，從而有利于有益菌群的增殖，競爭性抑制了腸桿菌屬等有害菌的數(shù)量，改變了腸道微生物