電刺激對肌衛(wèi)星細胞發(fā)育及分化影響的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 1 級碩士學(xué)位論文電刺激對肌衛(wèi)星細胞發(fā)育及分化影響的研究E v a l u a t i o n o f e l e c t r i c a ls t i m u l a t i o n o nm u s c l e s a t e l l i t ec e l ld e V e l o p m e n t a n d d i f ．f e r e n t i a t i o n課題來源：廣東省科技計劃項目( N

2、o ：1 1 A 5 6 0 4 0 6 5 9 )學(xué)位中請人 李靜遠導(dǎo)師姓名 葛平江專業(yè)名稱 耳鼻咽喉科學(xué)培養(yǎng)類型 學(xué)術(shù)型培養(yǎng)層次 碩士研究生所在學(xué)院 研究生學(xué)院夕突鋤’東汐“( 、7 枷護2 0 1 4 年5 月2 6 日廣州中文摘要方法：1 ．取體外培養(yǎng)的肌源性C 2 C 1 2 細胞株，采用固定電壓( 5 V ) 、固定刺激模式、不同脈寬( O m s ，1 m s ，2 m s ，4 m s ，8 m s ，2 0 m s 六

3、組) 的串刺激( 5 s ，3 s ．0 n ，2 s —o f r )細胞系，以及固定電壓( 5 V ) 、固定刺激模式、不同頻率( o p p s 、2 p p s 、1 0 p p s 、2 0 p p s 、4 0 p p s 、8 0 p p s 六組) 使用M T T 比色法、流式細胞周期檢測、q R T - P C R觀察細胞的活性、增殖及分化。2 ．取體外培養(yǎng)的比格犬頦舌肌衛(wèi)星干細胞體外培養(yǎng)，采用固定電壓( 5 V )

4、、固定脈寬、不同頻率( O p p s 、2 p p s 、1 0 p p s 、4 0 p p s 、8 0 p p s 、1 6 0 六組) 的串刺激( 5 s ，3 s ．o n ，2 s ．o f r ) 刺激細胞，使用M T T 比色法、流式細胞周期檢測和w b s t e m b l o t觀察細胞的活性、增殖及分化。3 ．用S P S S1 9 ．0 統(tǒng)計軟件進行分析。采用S p e a m a n 相關(guān)分析了解刺激脈寬及

5、頻率的增加同細胞活性、增殖和分化狀態(tài)的相關(guān)性。采用K r u s k a l ．W a l l i sH 非參數(shù)檢驗方法比較組間差異。以P < O ．0 5 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：1 ．隨著脈沖電刺激的脈寬增大會導(dǎo)致肌源性C 2 C 1 2 細胞的活性降低( 產(chǎn)一0 ．7 2 4 ，P < 0 ．0 1 ) ，分化能力有提高，在脈寬2 0 m s 時影響較大( p = 0 ．0 4 4 ) ；隨著電刺激的頻率加快，肌源性

6、C 2 C 1 2 細胞的增殖( ，c 0 ．6 4 3 ，P = 0 ．0 0 4 ) 和分化能力提高( F 0 ．6 3 7 ，P = 0 ．0 0 4 ；F 0 ．6 6 0 ，P = 0 ．0 0 3 ) ，分化的肌細胞亞型有從快型向慢型轉(zhuǎn)變的趨勢，在8 0 h z 時較明顯( P < O ．0 5 ) 。2 ．隨著電刺激的頻率加快，頦舌肌衛(wèi)星干細胞活性和增殖沒有變化，分化能力明顯提高，肌細胞亞型從快型向慢型轉(zhuǎn)變，在頻率為