p27在荔枝核總黃酮抑制人肝星狀細(xì)胞LX2增殖過(guò)程中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：通過(guò)荔枝核總黃酮(total flavonoids of litchi，TFL)作用于人肝星狀細(xì)胞LX2，研究TFL對(duì)LX2增殖及細(xì)胞周期的影響。初步探討TFL調(diào)控LX2細(xì)胞周期的相關(guān)作用機(jī)制，為T(mén)FL作為一種新的抗纖維化藥物提供理論依據(jù)。
　　方法：使用不同濃度(7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL)TFL處理LX2。采用CCK8法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活力;對(duì)細(xì)胞進(jìn)行PI染色后

2、，采用流式細(xì)胞儀分析各組細(xì)胞周期的分布情況;使用RT-PCR和Western blot技術(shù)測(cè)定TFL作用后LX2細(xì)胞中p27基因mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：TFL作用48h、72h可抑制LX2細(xì)胞增殖，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)，抑制效果更加明顯。在藥物作用72h后，7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL的不同濃度TFL對(duì)LX2細(xì)胞抑制率依次為7.42％±5.66％、9.88％±0.73

3、％、11.55％±3.35％、9.47％±3.67％、9.12％±5.35％,TFL最小劑量加藥組與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL TFL加藥組相對(duì)各對(duì)照組的差異性均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示，經(jīng)TFL干預(yù)72h后，7.8125、15.6250μg/mL加藥組和對(duì)照組細(xì)胞周期分布差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而31.2500、62.5

4、000、125.0000μg/mL加藥組相較對(duì)照組G0/G1期細(xì)胞數(shù)改變差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，S期細(xì)胞量明顯增多(P＜0.05)，G2/M期細(xì)胞量則相應(yīng)減少，此期改變部分具有差異性，提示TFL可將LX2細(xì)胞阻滯在S期。RT-PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)各組p27在RNA和蛋白水平上的表達(dá)量，結(jié)果提示隨著TFL濃度增大，加藥組p27的mRNA和蛋白量較對(duì)照組明顯升高。
　　結(jié)論：荔枝核總黃酮抑制人肝星狀細(xì)胞增