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文檔簡介
1、【目的】:流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合單克隆抗體檢測19例急性白血病患者及12例對照骨髓穿刺液單個核細(xì)胞組織因子表達(dá)陽性率;以FⅦ為標(biāo)記物免疫組織化學(xué)法檢測骨髓活檢組織微血管數(shù)目。了解急性白血病患者骨髓中組織因子表達(dá)及血管新生情況。初步探討急性白血病組織因子表達(dá)對血管新生的影響及其臨床意義。 【方法】:收集急性白血病(AL)患者19例,均為初治患者,其中男12例,女7例,年齡20歲-47歲,MO 3例,M1 2例,M2 3例,M3 3例,M4
2、 3例,M5 2例,ALL 3例。對照組:12例,其中男7例,女5例,為健康志愿者或我科特發(fā)性血小板減少性紫癜患者,經(jīng)骨髓檢查,骨髓增生正常。常規(guī)無菌獲取骨髓穿刺液及骨髓活檢組織,并制備成活檢組織標(biāo)本和骨髓標(biāo)本。免疫組化按照以下步驟:制備的切片脫蠟、水化;封閉內(nèi)源性過氧化物酶;抗原修復(fù);封閉非特異性抗原加兔抗人VWF多克隆抗體(一抗);加EnVision羊抗兔二抗試劑;DAB顯色;蘇木素復(fù)染;脫水、透明、封片;微血管計數(shù)。流式細(xì)胞術(shù)檢測
3、組織因子表達(dá):PBS液調(diào)整細(xì)胞濃度調(diào)整細(xì)胞數(shù)后,加入FITC標(biāo)記的TF單抗,24小時內(nèi)上機(jī)檢測。 【結(jié)果】:19例急性白血病患者骨髓單個核細(xì)胞組織因子表達(dá)陽性率54±13﹪,而12例對照未檢測到組織因子表達(dá);急性白血病患者骨髓微血管數(shù)目(20.8±7.5/×400視野),對照組微血管數(shù)目(9.2±2.4/×400視野),AL組與對照組相比較,明顯升高,兩者具有顯著差異性(p<0.05)。經(jīng)分析,急性白血病患者骨髓單個核細(xì)胞組織因
4、子表達(dá)陽性率和骨髓微血管數(shù)之間呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.7601,p<0.01)。 【結(jié)論】:與大多數(shù)腫瘤相似,急性白血病存在著顯著的病理性血管新生。血管新生可能在急性白血病白血病疾病過程中發(fā)揮重要作用;正常僅表達(dá)在少數(shù)細(xì)胞的組織因子在急性白血病患者骨髓單個核細(xì)胞存在高表達(dá)。且兩者之間有顯著的相關(guān)性。組織因子可能作為一種促血管生成因子啟動了血管形成開關(guān),從而導(dǎo)致血管新生。以組織因子為靶向的新的抗血管生成藥物或與化療藥物聯(lián)合有可能增加
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