PLGA仿生礦化及其對大鼠BMSCs粘附增殖和成骨分化影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分可降解生物材料PLGA仿生礦化的實(shí)驗(yàn)研究 目的：通過對PLGA的仿生礦化表面改性，以提高其生物學(xué)活性；探討影響仿生礦化的因素和條件，檢測礦化過程對PLGA支架材料孔隙率及生物力學(xué)強(qiáng)度的影響，為進(jìn)一步制備組織工程化人工骨提供依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：PLGA膜經(jīng)堿性溶液水解處理后，應(yīng)用高溫顯微鏡測量材料表面潤濕角的變化；堿處理后的PLGA膜和三維多孔PLGA分別在0.5倍SBF中礦化20天，在SBF中礦化14天，在1

2、.5倍SBF中礦化9天，應(yīng)用掃描電鏡進(jìn)行礦化物形貌觀察，X射線能譜分析鈣磷比值，X射線衍射儀和傅立葉轉(zhuǎn)換紅外光譜儀行礦化物物相分析，比重法測量礦化前后材料孔隙率的變化，津島生物力學(xué)測試儀測試材料礦化前后抗壓強(qiáng)度的變化。 結(jié)論：PLGA仿生礦化是制備結(jié)構(gòu)及性質(zhì)類似骨基質(zhì)人工骨的可行方法。 第二部分大鼠BMSCs的培養(yǎng)和鑒定 目的：大鼠BMSCs的體外獲取并鑒定，為進(jìn)一步行材料生物學(xué)性能的檢測提供細(xì)胞來源。

3、方法：取幼年SD大鼠骨髓，分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)特征、生長狀況，從表面抗原表達(dá)及生物學(xué)行為兩個(gè)方面進(jìn)行鑒定。 結(jié)論：分離培養(yǎng)的細(xì)胞成分單一，鑒定為BMSCs，可以應(yīng)用于材料生物學(xué)性能的檢測。 第三部分PLGA仿生礦化對大鼠BMSCs粘附增殖和成骨分化的影響 目的：通過檢測大鼠BMSCs在仿生礦化后PLGA表面粘附、增殖和成骨分化的行為，進(jìn)一步了解仿生礦化改性對PLGA生物學(xué)性能的影響，為進(jìn)一步構(gòu)建仿生

4、礦化人工骨提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將培養(yǎng)的大鼠BMSCs分別接種于未礦化的PLGA和礦化后的PLGA上，同時(shí)以煅燒松質(zhì)骨材料為對照，以間接計(jì)數(shù)法測定細(xì)胞接種24小時(shí)后的細(xì)胞粘附率；通過細(xì)胞DNA熒光定量檢測法測定細(xì)胞在各組材料上增殖的情況，并繪制細(xì)胞增殖曲線；應(yīng)用RT-PCR的方法測定各組材料上大鼠BMSCs成骨基因表達(dá)情況，通過比較成骨基因表達(dá)時(shí)間先后次序和量的變化，表明各組材料對BMSCs向成骨細(xì)胞分化的影響。 結(jié)論：