免疫細胞化學的方法在結腦早期診斷中的價值的研究.pdf

1、目的：結核性腦膜炎(tuberculosismeningitisTBM簡稱“結腦”)是常見的由結核桿菌侵犯中樞神經系統(tǒng)造成的感染性疾病，如果沒有得到及時治療，可造成嚴重和致命的后果，致殘率和致死率很高。由于結腦是一種能治愈的中樞神經系統(tǒng)感染性疾病，在早期階段進行特異性的治療是非常有效的，所以其預后的關鍵在于早期診斷、及時治療。作為微生物侵犯中樞神經系統(tǒng)導致的感染性疾病，找到病原體是診斷疾病的標準，所以結腦診斷的金標準是腦脊液(cereb

2、rospinalfluidCSF)中發(fā)現(xiàn)結核桿菌[1]。但結腦患者腦脊液的涂片抗酸染色陽性率很低，約為10％，而結核菌培養(yǎng)所需時間較長(1～2月)，且陽性率僅20-30％[2]。我們臨床醫(yī)生亟待尋找一種快速、可靠的診斷結核性腦膜炎的方法以便可以早期診斷，及時治療。本研究對結腦組，對照組進行腦脊液常規(guī)檢查和選用免疫細胞化學的方法對腦脊液單核細胞內的結核桿菌抗原進行檢測，以期找到一種簡單、快速、確診結腦的新方法，并對結腦的發(fā)病機制有所探討。

3、 方法：實驗組為35例結腦病人，均為臨床上診斷為結腦的住院病人，入選標準參考Ahuja[3]的臨床診斷標準，其中女15例，男20例，年齡2～65歲，平均33±15.5歲。對照組病人35例，為其他神經系統(tǒng)疾病患者：參考人民衛(wèi)生出版社第四版神經病學教科書[4]相應診斷標準入選，男16例，女19例，年齡6～75歲，平均33.3±16.6歲。所有病例入院后24～48小時內行腰穿，進行腦脊液常規(guī)、生化、細胞學染色以及墨汁染色、阿利新蘭染色

4、檢查。留取兩張以上腦脊液離心細胞涂片進行免疫細胞化學染色。 結果1.腦脊液常規(guī)檢查結果：35例TBM患者的腦脊液生化顯示為：蛋白升高的34例(0.36～3.63g/l)，1例蛋白正常(0.18g/l)；糖濃度降低的35例(0.01～3.7mmol/1)：氯化物降低的34例(91.8～128.3mmol/1)，氯化物正常的1例(131.4mmol/l)。細胞數(shù)0～1050個/mm3。2.腦脊液細胞學表現(xiàn)：結腦組腦脊液呈混合性細胞反

5、應的28例，其中以淋巴細胞為主的混合細胞反應14例，以嗜中性粒細胞為主的混合細胞反應9例，單純混合型細胞反應的5例，淋巴樣細胞學反應3例。阿利新蘭和墨汁染色均陰性。對照組腦脊液中以淋巴樣細胞反應為主有14例。5例化腦患者呈嗜中性粒細胞反應。3例隱球菌腦膜炎患者CSF中可見隱球菌，阿利新蘭染色和墨汁染色均陽性，腦囊蟲患者顯示嗜酸性粒細胞增加。3.免疫細胞化學染色結果：早期即可在腦脊液涂片上完整的單核樣細胞的胞漿內檢測到結核桿菌的抗原，在我

6、們的免疫細胞學染色中顯現(xiàn)為棕紅色的微粒，且細胞核周圍染色較深，細胞核不被染色。80％左右的單核樣細胞有陽性的顯色，且多次檢測可持續(xù)陽性。在35例結腦患者中30例顯示陽性，敏感性為85.7％，發(fā)病≤14天者17例陽性，占94.44％，15～30天者10例陽性，占83.33％，＞30天者3例陽性，占60％。對照組無一例陽性，特異性為100％。比較腦脊液細胞學與抗原檢測顯示，以嗜中性粒細胞為主的混合型細胞反應11例，抗原檢測11例陽性，以淋巴

7、細胞為主的混合型細胞反應15例，抗原檢測14例陽性，單純混合型細胞反應6例，抗原檢測4例陽性，淋巴樣細胞反應3例，抗原檢測1例陽性。35例病人中5例陰性，其中有4例單核細胞比例小于10％。 結論本研究選用免疫細胞化學的方法對腦脊液單核細胞內的結核桿菌抗原進行檢測及動態(tài)觀察腦脊液細胞學的變化，證實以上檢查對結腦的診斷、鑒別診斷及病情轉歸判斷均有很高的實用價值。實驗表明：免疫細胞化學方法和腦脊液細胞學對診斷結腦的敏感性較常規(guī)的抗酸桿