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1、肺癌的靶向治療逐漸成為研究人員關(guān)注的焦點(diǎn),可以提高治療效果同時(shí)減低傳統(tǒng)化療藥物對(duì)病人的不良反應(yīng)。通過(guò)連接肺癌腫瘤細(xì)胞特異性的靶向配體,將化療藥物或基因遞送到腫瘤細(xì)胞,進(jìn)而可以發(fā)揮各自的抗腫瘤作用。
在前期的實(shí)驗(yàn)研究中,篩選了實(shí)驗(yàn)室已有的材料例如:mPEG-PLGA-PLL、GPC-mPEG/磷脂、mPEG-PLA/CaP、普朗尼克F127/CaP,優(yōu)選出F127/CaP復(fù)合納米粒以及EGF修飾的mPEG-PLGA-PLL(PE
2、AL)聚合物載體材料。
磷酸鈣(CaP)是經(jīng)典的轉(zhuǎn)染載體,通常用來(lái)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒,然而將其應(yīng)用在siRNA遞送載體上相關(guān)研究并不多。1973年Graham建立了簡(jiǎn)便的磷酸鈣標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染方法。目前文獻(xiàn)報(bào)道存在的主要問(wèn)題是所制備的磷酸鈣納米粒子具有形貌差、尺寸不均勻、基因的裝載量小和轉(zhuǎn)染效率低等缺點(diǎn)。以磷酸鈣和多嵌段聚合物進(jìn)行復(fù)合構(gòu)建納米基因載體,其優(yōu)勢(shì)在于磷酸鈣納米顆粒具有良好的生物相容性、可降解性、低毒性,又能體現(xiàn)多嵌段聚合物的多功能性
3、。傳統(tǒng)的CaP轉(zhuǎn)染方法影響因素眾多,實(shí)驗(yàn)條件難以控制。復(fù)合有機(jī)物后,可以調(diào)控CaP的粒徑、表面電荷、形貌等性質(zhì),利于制備均一、穩(wěn)定的納米粒。通過(guò)復(fù)合聚合物普朗尼克(F127),增加復(fù)合納米粒的穩(wěn)定性。透射電鏡顯示制備的納米粒呈球型,粒徑在200nm左右。MTT實(shí)驗(yàn)證實(shí)了復(fù)合納米粒細(xì)胞毒性小。以H1299 EGFP為細(xì)胞模型,復(fù)合納米粒與傳統(tǒng)的CaP轉(zhuǎn)染試劑相比,基因沉默效果更為明顯。復(fù)合F127/CaP納米粒作為siRNA遞送載體,具有
4、良好的應(yīng)用前景。
EGFR是一種肺癌細(xì)胞高表達(dá)的特異性的膜表面蛋白,通過(guò)特異性的識(shí)別EGFR介導(dǎo)的內(nèi)吞,提高肺癌腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞的特異性。本文研究EGF修飾的聚乙二醇/聚丙交酯-乙交酯/聚賴(lài)氨酸Methoxy-poly(ethylene glycol)-b-poly(D,L-lactide-co-glycolide)-b-poly(L-lysine)(mPEG-PLGA-PLL簡(jiǎn)寫(xiě)為PEAL),通過(guò)溶劑-乳化蒸發(fā)法制備EGF修飾的
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