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1、目的:探討卡介苗(BCG)對(duì)白血病患兒外周血來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)體外擴(kuò)增的影響。 方法:應(yīng)用Ficoll-Hypaque法分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),對(duì)照組以RPMI-1640培養(yǎng)液誘導(dǎo)白血病患兒外周血單個(gè)核細(xì)胞生成DC,實(shí)驗(yàn)組分為BCG(單純加入卡介苗)、GTI(加入細(xì)胞因子)及GTIB(卡介苗十細(xì)胞因子)3個(gè)亞組,誘導(dǎo)PBMC生成DC。光鏡下觀察DC形態(tài)。于培養(yǎng)第8天,計(jì)數(shù)各組中DC,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞免疫表
2、型,光鏡下觀察并攝片。 結(jié)論:1、卡介苗體外能從白血病患兒外周血誘導(dǎo)出一定數(shù)量的DC,提示卡介苗能夠促進(jìn)白血病患兒外周血DC體外擴(kuò)增,但其效果不及細(xì)胞因子組。 2、卡介苗體外能提高DC細(xì)胞HLA-DR+、CD83+抗原的表達(dá),尤其在GTIB組更為明顯,提示卡介苗能夠協(xié)同細(xì)胞因子促進(jìn)白血病患兒外周血DC成熟。 目的:探討卡介苗(BCG)對(duì)白血病患兒外周血來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)介導(dǎo)的抗白血病作用。 方法:應(yīng)用
3、Ficoll-Hypaque法分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),將獲得的上述細(xì)胞(1×106/ml)隨機(jī)分6組: A組(GTI組):PBMC+rhGM-CSF+rhTNF-α+rhIL-4;B組(BCG組),分B1、B2、B33亞組,PBMC+加入不同濃度的BCG,其濃度分別為25ul、50ul、75ul;C組(GTI+BCG組):PBMC+rhGM-CSF+rhTNF-α+rhIL-4+BCG50ul;D組(對(duì)照組):PBMC+ R
4、PMI1640。誘導(dǎo)PBMC生成DC,光鏡下觀察DC形態(tài)。收獲培養(yǎng)第8天的DC,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)DC免疫表型后,將DC與急粒緩解期患兒外周血淋巴細(xì)胞及HL-60細(xì)胞混合,誘導(dǎo)出抗原特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞,MTT法檢測(cè)其殺傷活性。 結(jié)論:1、卡介苗能促進(jìn)白血病患兒外周血DC的成熟。 2、卡介苗能增強(qiáng)白血病患兒外周血來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞介導(dǎo)的抗白血病免疫效應(yīng)。 3.卡介苗的濃度對(duì)白血病患兒外周血DC的成熟及DC介導(dǎo)的抗白
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