急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究.pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究姓名：孟冬梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科（血液學(xué)）指導(dǎo)教師：趙春亭2003.4.1中文摘要急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院2000級(jí)臨床血液學(xué)專業(yè)碩士研究生盂冬梅導(dǎo)師趙春亭主任醫(yī)師摘要目的將急性髓細(xì)胞白血病(AML)細(xì)胞誘導(dǎo)成為樹突狀細(xì)胞(Des)并進(jìn)行其功能研究。方法使用淋巴細(xì)胞分離液，分離25例AML患者骨髓或外周血單個(gè)核細(xì)胞，

2、在含有細(xì)胞因子rhGM—CSF，rhlL4，rhTNFq的IMDM完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)8一12天。在側(cè)置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，經(jīng)離心涂片機(jī)制備細(xì)胞涂片，姬式染色后觀察細(xì)胞形態(tài)。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定誘導(dǎo)前后細(xì)胞表型，應(yīng)用熒光原位雜交(FISH)進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分析，通過同種異體混臺(tái)淋巴細(xì)胞反應(yīng)(A1loMLR)一啊TdR摻入法，檢測(cè)其刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖的能力。結(jié)果25例中有20例自誘導(dǎo)培養(yǎng)的第3天起，在倒置顯微鏡下可觀察到部分細(xì)胞體

3、積增大，形態(tài)由圓形變得不規(guī)則，呈多形性，可見駝峰樣或細(xì)刺狀胞漿突起。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，絕大多數(shù)細(xì)胞總數(shù)較起始減少，但具有上述形態(tài)的細(xì)胞數(shù)量逐漸增加；在誘導(dǎo)培養(yǎng)的第8—9天，該類細(xì)胞所占的比例達(dá)到峰值；誘導(dǎo)培養(yǎng)至第12天，細(xì)胞總數(shù)及上述形態(tài)的細(xì)胞數(shù)量明顯減少。誘導(dǎo)培養(yǎng)結(jié)束時(shí)(8—12天)收集細(xì)胞，檢測(cè)了18／20例誘導(dǎo)后細(xì)胞表面標(biāo)志(CDla，CD54，CD80，CD83，CD86，HLA—DR)的表達(dá)。比較了其中11例誘導(dǎo)前后細(xì)胞各表

4、面標(biāo)志表達(dá)的情況，結(jié)果表明，誘導(dǎo)前CDla，C980，CD83的表達(dá)陰性，54％細(xì)胞表達(dá)HLADR，52％細(xì)胞表達(dá)CD54，25％細(xì)胞表達(dá)CD86；誘導(dǎo)后CDIa，CD80，CD83，HLA—DR，CD54，CD86的表達(dá)率分別為32％，187％，38％，103％，532％，397％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，HLADR表達(dá)無顯著差異(PO05)，其他表面標(biāo)志的表達(dá)差異均有顯著意義(P001)；而且，各表面標(biāo)志的表達(dá)與細(xì)胞在Allo—MLR中刺激T