急性髓細胞白血病細胞來源的樹突狀細胞的誘導及功能研究.pdf

1、青島大學碩士學位論文急性髓細胞白血病細胞來源的樹突狀細胞的誘導及功能研究姓名：孟冬梅申請學位級別：碩士專業(yè)：內科（血液學）指導教師：趙春亭2003.4.1中文摘要急性髓細胞白血病細胞來源的樹突狀細胞的誘導及功能研究青島大學醫(yī)學院2000級臨床血液學專業(yè)碩士研究生盂冬梅導師趙春亭主任醫(yī)師摘要目的將急性髓細胞白血病(AML)細胞誘導成為樹突狀細胞(Des)并進行其功能研究。方法使用淋巴細胞分離液，分離25例AML患者骨髓或外周血單個核細胞，

2、在含有細胞因子rhGM—CSF，rhlL4，rhTNFq的IMDM完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)8一12天。在側置顯微鏡下觀察細胞的生長情況，經離心涂片機制備細胞涂片，姬式染色后觀察細胞形態(tài)。應用流式細胞術測定誘導前后細胞表型，應用熒光原位雜交(FISH)進行細胞遺傳學分析，通過同種異體混臺淋巴細胞反應(A1loMLR)一啊TdR摻入法，檢測其刺激同種異體T淋巴細胞增殖的能力。結果25例中有20例自誘導培養(yǎng)的第3天起，在倒置顯微鏡下可觀察到部分細胞體

3、積增大，形態(tài)由圓形變得不規(guī)則，呈多形性，可見駝峰樣或細刺狀胞漿突起。隨著培養(yǎng)時間的延長，絕大多數細胞總數較起始減少，但具有上述形態(tài)的細胞數量逐漸增加；在誘導培養(yǎng)的第8—9天，該類細胞所占的比例達到峰值；誘導培養(yǎng)至第12天，細胞總數及上述形態(tài)的細胞數量明顯減少。誘導培養(yǎng)結束時(8—12天)收集細胞，檢測了18／20例誘導后細胞表面標志(CDla，CD54，CD80，CD83，CD86，HLA—DR)的表達。比較了其中11例誘導前后細胞各表

4、面標志表達的情況，結果表明，誘導前CDla，C980，CD83的表達陰性，54％細胞表達HLADR，52％細胞表達CD54，25％細胞表達CD86；誘導后CDIa，CD80，CD83，HLA—DR，CD54，CD86的表達率分別為32％，187％，38％，103％，532％，397％。經統(tǒng)計學分析，HLADR表達無顯著差異(PO05)，其他表面標志的表達差異均有顯著意義(P001)；而且，各表面標志的表達與細胞在Allo—MLR中刺激T